自然排卵数の20倍以上の排卵を可能とするGDF-9・VEGF遺伝子導入法の開発

开发GDF-9/VEGF基因导入方法，使排卵量超过自然排卵数20倍

• 批准号: 17658119
• 负责人: 佐藤 英明
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17658119/
• 关键词: 卵子形成; GDF-9遺伝子; VEGF遺伝子; ヒアルロン酸; アポトーシス; peptidyl-prolyl; isomerase has1; CD44; peptidyl-prolyl isomerase; has1

1)TAP-GDF-9遺伝子をラット卵巣に直接注射したところ2次及び3次卵胞数が有意に増加した。また、TAP-GDF-9遺伝子注射の後にTAP-VEGF遺伝子を注射すると胞状卵胞数が顕著に増加した。TAP-GDF-9遺伝子-TAP-VEGF遺伝子併用法は卵胞発育促進法として優れていることを明らかにした。本実験を繰り返し、2つの論文としてまとめ投稿中である。2)卵子周囲の卵丘細胞が卵子生存に促進的に働くこと、卵丘細胞間質に蓄積するヒアルロン酸が生存促進作用をもち、アポトーシスのintrinsic pathwayの活性化を抑制することを示した。また、FSHはintrinsicとextrinsic pathwayの2つのカスケードを通して卵子退行抑制・生存促進に機能することを明らかにし、論文を執筆中である。3)peptidyl-prolyl isomerase (Pin 1)アポトーシス)が卵子形成の最終段階(卵子成熟)で機能することを明らかにし、論文にまとめた。現在、印刷中である。4)ヒアルロン酸合成酵素遺伝子及びタンパク質の発現を解析し、卵子に発現するhas1遺伝子及びそのタンパク質がが卵子生存促進に働くことを明らかにした。5)卵胞閉鎖においてマクロファージはアポトーシス残渣を消去するのに必要不可欠である。しかしながら、この過程において鍵となる因子は明らかにされていない。そこでブタ卵胞閉鎖におけるマクロファージでのCD44 mRNA、CD44タンパク質、CD44糖鎖修飾を調べ、詳細を明らかにした。論文としてまとめて公表した。

1)将TAP-GDF-9基因直接注射到大鼠卵巢中，二级和三级卵泡的数量显着增加。此外，当注射TAP-GDF-9基因后注射TAP-VEGF基因时，窦卵泡的数量显着增加。结果表明，TAP-GDF-9基因-TAP-VEGF基因组合方法是促进卵泡生长的极佳方法。我们重复了这个实验，目前正在提交两篇论文。 2）我们发现卵母细胞周围的卵丘细胞促进卵子存活，而积聚在卵丘细胞间质中的透明质酸具有促进存活的作用并抑制细胞凋亡内在途径的激活。此外，我们已经阐明 FSH 通过内在和外在途径这两个级联来抑制卵子退化并促进存活，目前正在撰写一篇论文。 3）我们阐明了肽基脯氨酰异构酶（Pin 1）细胞凋亡）在卵子发生（卵母细胞成熟）的最后阶段发挥作用，并在论文中对此进行了总结。目前正在印刷中。 4）我们分析了透明质酸合酶基因和蛋白的表达，发现鸡蛋中表达的has1基因及其蛋白具有促进鸡蛋存活的作用。 5）巨噬细胞对于卵泡闭锁期间清除凋亡碎片至关重要。但这一过程中的关键因素尚未明确。因此，我们研究了猪滤泡闭锁期间巨噬细胞中的CD44 mRNA、CD44蛋白和CD44糖基化，并阐明了细节。结果被汇编并作为论文发表。

项目成果

Significance of the mammalian cumulus-oocyte complex matrix in oocyte meiotic maturation : Synthetic control and possible roles of hyaluronan (HA) and HA-binding protein.

哺乳动物卵丘-卵母细胞复合基质在卵母细胞减数分裂成熟中的意义：透明质酸 (HA) 和 HA 结合蛋白的合成控制和可能作用。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J.Mamm.Ova Res (in press)
• 作者: 矢部光保;河野正男;八木裕之;斎尾浩一郎;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;佐藤英明;佐藤英明
• 通讯作者: 佐藤英明

Expression of Pin 1, a peptidyl-prolyl isomerase, in the ovary of eCG/hCG-treated immature female mice.

Pin 1（一种肽基脯氨酰异构酶）在 eCG/hCG 处理的未成熟雌性小鼠卵巢中的表达。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J.Reprod.Dev (in press)
• 作者: 矢部光保;河野正男;八木裕之;斎尾浩一郎;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明
• 通讯作者: 佐藤英明

PKA is implocated in the phosphorylation of Cx43 induced by stimulation with FSH in rat granulosa cells.

PKA 参与大鼠颗粒细胞中 FSH 刺激诱导的 Cx43 磷酸化。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J.Reprod.Dev. 52(3)
• 作者: 矢部光保;河野正男;八木裕之;斎尾浩一郎;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato
• 通讯作者: Eimei Sato

Cryopreservation and in vitro maturation of germinal vesicle stage oocytes of animals for application in assisted reproductive technology.

动物生发囊泡期卵母细胞的冷冻保存和体外成熟在辅助生殖技术中的应用。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Reprod.Med.Biol. (in press)
• 作者: 矢部光保;河野正男;八木裕之;斎尾浩一郎;Eimei Sato
• 通讯作者: Eimei Sato

マウス胚の操作マニュアル第3版(翻訳)

小鼠胚胎操作手册第3版（翻译）

• 发表时间: 2005
• 作者: 矢部光保;河野正男;八木裕之;斎尾浩一郎;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;Eimei Sato;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明;佐藤英明
• 通讯作者: 佐藤英明