体細胞クローン技術による遺伝子改変ブタ作出技術の開発

利用体细胞克隆技术开发转基因猪生产技术

基本信息

批准号：
12896006
负责人：
佐藤英明
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

「体細胞クローン技術(核移植)による遺伝子改変ブタ作出技術の開発」は、(1)移植用臓器提供ブタの作製、(2)ヒトゲノムプロジェクトにおける新規遺伝子、特に脳や高次機能に係わる遺伝子の機能解析、(3)有用な生理活性物質の乳、尿などを経由しての大量生産のため必要である。またこのような技術は(4)優良ブタの増産にも必要である。そのために、1)相同組換え率の高いブタ培養細胞の樹立、2)ブタ細胞への遺伝子導入、遺伝子ノックアウト技術の開発、3)成熟未受精卵の安定供給系の開発、4)核移植技術の開発、5)核移植胚の安定培養系の開発、6)核移植胚の凍結保存技術の開発が必要である。研究代表者は、すでに1〜6について検討を進め、次のような成果をあげている。(a)体外で作出した脱出胚盤胞がフィーダー細胞に接着して増殖し、胚由来細胞のコロニーを形成することを明らかにした。作製した胚由来細胞は凍結保存している。(b)除核した成熟卵子に胚由来細胞を導入する方法を開発した。(c)融合した再構築胚を発生させることに成功した。(d)異種抗原産生酵素の遺伝子をノックアウトするベクターを開発した。このような成果を踏まえ、国内の研究を組織化し、より一層の研究推進を図りたく思っている。また、核移植技術による遺伝子改変ブタ作出技術をより有効にするため、個々の技術はもとより、どのような周辺技術を発展させるかについて方向性を明確にする必要がある。そこで研究を推進するとともに「ブタにおける発生工学の展望-ヒト型臓器生産ブタの開発をめざして」と題する検討会を行った。また英文総説集として「Pigs for xenotransplantation,a2000perspective-」を出版した。

“利用体细胞克隆技术（核移植）开发转基因猪生产技术”涉及（1）生产用于移植的器官供体猪，（2）开发人类基因组计划中的新基因，特别是与大脑和大脑相关的基因。 (3)通过乳汁、尿液等大量生产有用的生理活性物质。这种技术对于（4）提高优质生猪产量也是必要的。为此，我们将1）建立高同源重组率的培养猪细胞，2）开发猪细胞基因导入和基因敲除技术，3）开发成熟未受精卵的稳定供应系统，4）核移植技术5）核移植胚胎稳定培养系统的开发；6）核移植胚胎冷冻保存技术的开发。主要研究者已经对第1至6项进行了研究，并取得了以下成果。 (a) 据揭示，体外产生的外植囊胚粘附于饲养细胞并增殖，形成胚胎衍生细胞集落。产生的胚胎衍生细胞被冷冻保存。 (b)我们开发了一种将胚胎来源的细胞引入去核成熟卵母细胞的方法。 (c) 成功生成融合重建胚胎。 (d) 我们开发了一种载体，可以敲除异源抗原产生酶的基因。基于这些成果，我们希望组织国内研究并进一步推动研究。此外，为了使利用核移植技术培育转基因猪的技术更加有效，不仅需要明确个别技术的开发方向，而且还需要明确周边技术的开发方向。除了促进研究之外，我们还成立了一个研究小组，题为“猪发育工程的前景 - 旨在开发能够产生类人器官的猪。”他还出版了英文评论集《异种移植的猪，2000 年的观点》。