新型ウイルス感染症を標的とした新たな免疫治療法確立のための基盤研究

建立针对新病毒感染的新免疫治疗方法的基础研究

基本信息

批准号：
21H02966
负责人：
村口篤
金额：
$ 11.07万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

【研究課題１】ウイルスペプチド/HLAを認識する高親和性TCR様抗体のBiTE作製と評価：前年度に取得したウイルスペプチド/HLAを認識する高親和性TCR様抗体を用いてBiTEを作製し、機能を評価した。BiTEは、TCR様抗体(BRLF1p/HLA-A24抗体)と抗CD-scFvのキメラ蛋白(BRLF1p/HLA-A24抗体/CD3 BiTE)を作製した。機能評価はHLA24陰性の末梢血CD3+リンパ球と標的細胞(あらかじめBRLF1pをパルスしたルシフェラーゼ発現型T2-A24細胞株(BRLF1p/T2-A24-Luc)を共培養し、Luc蛍光を測定して傷害活性を評価した。その結果、我々が作成したBiTEは標的細胞を傷害することが実証され、取得した高親和性TCR様抗体のBiTEが将来臨床応用される可能性が示唆された。【研究課題2】健常人・新型コロナ感染患者のウイルスペプチド特異的T細胞の同定：宇高らは、先に作製したHLA-A*24:02結合性ペプチド予測プラットフォームを用いて、新型コロナウイルスのスパイク蛋白由来ペプチドを複数予測することに成功した。その結果、新型コロナワクチン接種健常人あるいは感染者の末梢血T細胞からコロナウイルスペプチド特異的キラーT細胞を効率的に取得できる可能性が示された。さらに、MHC class II分子へのペプチドの結合活性を測るための技術を新しく樹立して、HLA-DRB1*04:05、DRB1*08:03について、任意のペプチドの結合値を予測する自動予測プラットフォームの作製に成功した。その結果、コロナウイルス特異的キラーT細胞のみならず、コロナウイルス特異的ヘルパーT細胞のTCRの効率的取得への道が世界に先駆けて開けた。

[研究问题1]使用高亲和力TCR样抗体识别上一年获得的病毒肽/HLA的高亲和力TCR样抗体的咬合的咬合和评估，对识别病毒肽/HLA：咬合进行了咬合，并评估了其功能及其功能。咬伤产生了TCR样抗体（BRLF1P/HLA-A24抗体）和抗CD-SCFV的嵌合蛋白（BRLF1P/HLA-A24抗体/CD3 BITE）。 The functional evaluation was performed by co-culturing HLA24-negative peripheral blood CD3+ lymphocytes and target cells (a luciferase-expressing T2-A24 cell line (BRLF1p/T2-A24-Luc) with luciferase-expressing T2-A24 cell line (BRLF1p/T2-A24-Luc) with Luc fluorescence measured to assess the injury结果，我们的咬合可能会损害目标细胞，表明所获得的高亲和力TCR抗体咬合可以在未来使用[研究项目2]。 HLA-A*24：02结合肽预测平台。此外，MHC我们已经建立了一项新技术来测量肽与II类分子的结合活性，并成功地创建了一个自动预测平台，该平台可以预测HLA-DRB1*04：04：05和DRB1*08：03的任何肽的结合值。结果，有效获取TCR的途径不仅是针对冠状病毒特异性杀伤细胞的，而且对于冠状病毒特异性的辅助辅助辅助助手T细胞也在世界前开放。

项目成果

期刊论文数量（25）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Rapid and efficient generation of T-cell receptor-like antibodies using chip-based single-cell analysis.

使用基于芯片的单细胞分析快速有效地生成 T 细胞受体样抗体。

DOI：
10.1002/eji.202049083
发表时间：
2021
期刊：
Eur. J. Immunol.
影响因子：
0
作者：
Ozawa T;Kobayashi E;Hamana H;Nakamura T;Lyu F;Hayashi A;Muraguchi A;Kishi H
通讯作者：
Kishi H

TCR function analysis using a novel system reveals the multiple unconventional tumor‐reactive T cells in human breast cancer‐infiltrating lymphocytes

DOI：
10.1002/eji.202049070
发表时间：
2021-06
期刊：
European Journal of Immunology
影响因子：
5.4
作者：
S. Yamaguchi;H. Hamana;Kiyomi Shitaoka;K. Sukegawa;T. Nagata;A. Hayee;E. Kobayashi;Tatsuhiko Ozawa;T. Fujii;A. Muraguchi;K. Tobe;H. Kishi
通讯作者：
S. Yamaguchi;H. Hamana;Kiyomi Shitaoka;K. Sukegawa;T. Nagata;A. Hayee;E. Kobayashi;Tatsuhiko Ozawa;T. Fujii;A. Muraguchi;K. Tobe;H. Kishi

Establishment of an evaluation method for donor HLA antigen sensitization using CD14 monocytes from organ transplant recipients.

建立利用器官移植受者的CD14单核细胞评估供体HLA抗原致敏性的方法。