新型ウイルス感染症を標的とした新たな免疫治療法確立のための基盤研究

建立针对新病毒感染的新免疫治疗方法的基础研究

基本信息

批准号：
21H02966
负责人：
村口篤
金额：
$ 11.07万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

【研究課題１】ウイルスペプチド/HLAを認識する高親和性TCR様抗体のBiTE作製と評価：前年度に取得したウイルスペプチド/HLAを認識する高親和性TCR様抗体を用いてBiTEを作製し、機能を評価した。BiTEは、TCR様抗体(BRLF1p/HLA-A24抗体)と抗CD-scFvのキメラ蛋白(BRLF1p/HLA-A24抗体/CD3 BiTE)を作製した。機能評価はHLA24陰性の末梢血CD3+リンパ球と標的細胞(あらかじめBRLF1pをパルスしたルシフェラーゼ発現型T2-A24細胞株(BRLF1p/T2-A24-Luc)を共培養し、Luc蛍光を測定して傷害活性を評価した。その結果、我々が作成したBiTEは標的細胞を傷害することが実証され、取得した高親和性TCR様抗体のBiTEが将来臨床応用される可能性が示唆された。【研究課題2】健常人・新型コロナ感染患者のウイルスペプチド特異的T細胞の同定：宇高らは、先に作製したHLA-A*24:02結合性ペプチド予測プラットフォームを用いて、新型コロナウイルスのスパイク蛋白由来ペプチドを複数予測することに成功した。その結果、新型コロナワクチン接種健常人あるいは感染者の末梢血T細胞からコロナウイルスペプチド特異的キラーT細胞を効率的に取得できる可能性が示された。さらに、MHC class II分子へのペプチドの結合活性を測るための技術を新しく樹立して、HLA-DRB1*04:05、DRB1*08:03について、任意のペプチドの結合値を予測する自動予測プラットフォームの作製に成功した。その結果、コロナウイルス特異的キラーT細胞のみならず、コロナウイルス特異的ヘルパーT細胞のTCRの効率的取得への道が世界に先駆けて開けた。

[研究课题1]识别病毒肽/HLA的高亲和力TCR样抗体的BiTE制作和评价：使用前一年获得的识别病毒肽/HLA的高亲和力TCR样抗体制作BiTE，并对其功能进行评价。。对于 BiTE，我们创建了 TCR 样抗体（BRLF1p/HLA-A24 抗体）和抗 CD-scFv（BRLF1p/HLA-A24 抗体/CD3 BiTE）的嵌合蛋白。为了进行功能评估，将HLA24阴性外周血CD3+淋巴细胞和靶细胞（预先用BRLF1p脉冲的表达荧光素酶的T2-A24细胞系（BRLF1p/T2-A24-Luc）共培养，并检测Luc荧光。结果表明，我们创建的BiTE能够损伤靶细胞，表明高亲和力的类TCR抗体BiTE将来可以用于临床[研究主题2] Ken。普通人和感染新型冠状病毒的患者中病毒肽特异性T细胞的鉴定：Utaka等人利用之前创建的HLA-A*24:02结合肽预测平台鉴定了源自新冠病毒刺突蛋白的多种肽。研究结果表明，可以从接种过新型冠状病毒疫苗或感染过的健康个体的外周血T细胞中高效获得MHC肽特异性杀伤T细胞。通过建立测量肽与 II 类分子的结合活性的新技术，我们将创建一个自动预测平台，预测任意肽与 HLA-DRB1*04:05 和 DRB1*08:03 的结合值。，我们成为世界上第一个不仅能够有效获得冠状病毒特异性杀伤 T 细胞而且还能获得冠状病毒特异性辅助 T 细胞的 TCR 的公司。

项目成果

期刊论文数量（25）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Rapid and efficient generation of T-cell receptor-like antibodies using chip-based single-cell analysis.

使用基于芯片的单细胞分析快速有效地生成 T 细胞受体样抗体。

DOI：
10.1002/eji.202049083
发表时间：
2021
期刊：
Eur. J. Immunol.
影响因子：
0
作者：
Ozawa T;Kobayashi E;Hamana H;Nakamura T;Lyu F;Hayashi A;Muraguchi A;Kishi H
通讯作者：
Kishi H

TCR function analysis using a novel system reveals the multiple unconventional tumor‐reactive T cells in human breast cancer‐infiltrating lymphocytes

DOI：
10.1002/eji.202049070
发表时间：
2021-06
期刊：
European Journal of Immunology
影响因子：
5.4
作者：
S. Yamaguchi;H. Hamana;Kiyomi Shitaoka;K. Sukegawa;T. Nagata;A. Hayee;E. Kobayashi;Tatsuhiko Ozawa;T. Fujii;A. Muraguchi;K. Tobe;H. Kishi
通讯作者：
S. Yamaguchi;H. Hamana;Kiyomi Shitaoka;K. Sukegawa;T. Nagata;A. Hayee;E. Kobayashi;Tatsuhiko Ozawa;T. Fujii;A. Muraguchi;K. Tobe;H. Kishi

Establishment of an evaluation method for donor HLA antigen sensitization using CD14 monocytes from organ transplant recipients.

建立利用器官移植受者的CD14单核细胞评估供体HLA抗原致敏性的方法。