p62結合蛋白KFB14の破骨細胞分化における役割の研究

p62结合蛋白KFB14在破骨细胞分化中的作用研究

基本信息

批准号：
09F09144
负责人：
高柳広
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09F09144/
关键词：
破骨細胞カルシウムシグナル NFATc1 転写因子 FK506 RANKLシグナル

项目摘要

FKBP14は破骨細胞分化過程においてRANK1刺激に伴って発現が誘導されることを見出したが、FKBP14遺伝子を単独でノックダウンしても、破骨細胞分化に顕著な際は見られなかった。そこで、FKBP14-カルシニューリン経路に依存しない、他の必須のシグナル伝達について解析を進めた。(1)破骨細胞分化過程のマスター転写因子NFATc1の活性化はカルシウム-カルシニューリンに依存する。その分子メカニズムの解明に着手し、MAPKKKファミリーに属するTAK1がNFATc1を顕著に活性化することを見出した。(2)骨髄細胞由来破骨細胞前駆細胞にTAK1を過剰発現すると、リン酸化フォームのNFATc1が増加した。(3)TAK1はカルシニューリンに対して抑制的に働くRCAN1と結合することが報告されている。そこで、RCAN1の破骨細胞分化における役割を解析した。RCANは3つのメンバー(RCAN1、RCAN2、RCAN3)でファミリーを構成している。これらはすべて破骨細胞前駆細胞の段階から分化過程を通して発現していることを確認した。そこで、これらにたいするshRNAを作成し、破骨細胞分化に対する効果を検討した。各種、RCANに対するノックダウン効果が十分であることを確認したが、これらのshRNAは破骨細胞分化を抑制しなかった。3つのアイソフォームが存在するために、1つの発現抑制を他のアイソフォームが相補している可能性が示唆される。そのため、3つのアイソフォームを共通して認識するshRNAやdominant negativeに機能するRCAN1の過剰発現の効果を検討することで、TAK1-RCANs-NFATc1シグナル経路の意義を明らかにすることが必要と考えられた。

尽管发现在破骨细胞分化过程中，FKBP14的表达与Rank1刺激一起诱导，但仅敲低FKBP14基因并未显示出任何明显的骨细胞分化。因此，我们开始分析与FKBP14-钙调蛋白途径无关的其他基本信号传导。（1）在破骨细胞分化过程中主转录因子NFATC1的激活取决于钙 - 卡尼尔蛋白酶。我们开始阐明这种分子机制，发现属于MAPKKK家族的Tak1显着激活NFATC1。（2）骨髓衍生的破骨细胞前体细胞中TAK1的过表达增加了磷酸化形式的NFATC1。（3）据报道，TAK1与RCAN1结合，RCAN1对钙调神经酶的作用。因此，分析了RCAN1在破骨细胞分化中的作用。 RCAN由三个成员组成（RCAN1，RCAN2，RCAN3）。已经证实，所有这些都在整个破骨细胞前体细胞阶段的分化过程中表达。因此，为这些创建了SHRNA，并研究了其对破骨细胞分化的影响。尽管已经确认对各种RCAN的敲低作用足够，但这些shRNA并未抑制破骨细胞的分化。三种同工型的存在表明其他同工型可以补充一种表达的抑制。因此，人们认为有必要通过检查shRNA的过表达的效果来阐明tak1-rcans-nfatc1信号途径的重要性，shRNA的过表达的效果通常识别出三种同工型和rCAN1，这些同工型和RCAN1在主要负阴性中起作用。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

New immune regulator of bone

新的骨免疫调节剂

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Hans-Jurgen Gober;古賀貴子;高柳広;Koide Y;高柳広;高柳広
通讯作者：
高柳広

概論骨と免疫の不可分な関係に立脚した新たな生体理解

概述：基于骨骼与免疫密不可分的关系对身体的新认识

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
実験医学 27
影响因子：
0
作者：
M.Tomita;K.Ifuku;F.Sato;T.Noguchi;Hisabori T.;高柳広
通讯作者：
高柳広

破骨細胞分化決定の分子メカニズムと骨免疫学

破骨细胞分化测定及骨免疫学的分子机制

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
臨床血液 50
影响因子：
0
作者：
Nanno;M.;Kanari;Y.;Naito;T.;Inoue;N.;Hisamatsu;T.;Chinen;H.;Sugimoto;K.;Shimomura;Y.;Yamagishi;H.;Shiohara;T.;Uehara;S.;Matsushima;K.;Suematsu;M.;Mizoguchi;A.;Hibi;T.;Bhan;A. K.;Ishikawa;H.;T.Kogure et al.;高柳広
通讯作者：
高柳広

破骨細胞分化を司る免疫制御分子ネットワーク

控制破骨细胞分化的免疫调节分子网络