Analysis of the role of sRANKL in the bone-tumor microenvironment in immune checkpoint inhibitor treatment

免疫检查点抑制剂治疗中sRANKL在骨肿瘤微环境中的作用分析

基本信息

批准号：
20F20730
负责人：
高柳広
金额：
$ 1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-07-29 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20F20730/
关键词：
がん骨転移 RANKL がん免疫骨免疫学

项目摘要

ヒト骨転移巣のシングルセルRNA-seqデータを再解析することで、正常骨髄および骨転移巣微小環境内の免疫細胞亜集団を調べ、RANKやRANKL発現を指標に、骨転移巣病態に関与するRANKL発現細胞とRANK発現細胞の候補を選定した。候補細胞特異的なRANKL欠損マウス、およびRANK欠損マウスを用いてマウス乳がん細胞株EO771、メラノーマ細胞株B16F10の左心室移植によるがん骨転移モデルマウスを実施し、免疫チェックポイント阻害剤の効果を検討することで、骨転移巣の抗腫瘍免疫応答に関わるRANKL産生細胞とRANK発現細胞の特定に取り組んだ。さらにEO771及びB16F10がん骨転移モデルマウスにおいて、抗RANKL抗体単剤、免疫チェックポイント阻害剤単剤、および両者の併用療法による治療効果を比較検討し、各条件における骨転移巣部位のCD8 T細胞、CD4 T細胞、NK細胞の活性化状態・サイトカイン産生を解析することで、RANKL抑制による抗腫瘍免疫応答の変化を明らかにした。最終的に、免疫チェックポイント阻害剤投与および非投与マウスの骨転移巣、および正常骨髄から、RANKL発現免疫細胞を単離し、網羅的遺伝子発現解析を実施することで、免疫チェックポイント阻害剤がRANKL発現細胞に与える影響を遺伝子レベルで明らかにし、がん骨転移におけるRANKLによる抗腫瘍免疫応答制御の分子機構を解析した。

通过从人骨转移中重新分析单细胞RNA-SEQ数据，我们研究了正常骨髓和骨转移微环境中的免疫细胞亚群，以及选择了表达RANKL的细胞的候选候选物，以及与骨转移病理学的表达和表达型的表达等级的细胞，并使用等级表达表达和rankL表达表达指示器。我们使用候选细胞特异性的RANKL缺乏小鼠进行了癌症骨转移模型，并对小鼠乳腺癌细胞系EO771和黑色素瘤细胞系B16F10进行了左心室移植，并研究了免疫检查点抑制剂的作用，并鉴定出对骨骼的远程抗肿瘤，并研究了对骨骼的抗压细胞的影响。此外，在具有EO771和B16F10癌症骨转移模型的小鼠中，单独的抗氧化剂抗体的影响，单独比较了免疫检查点抑制剂，并比较了组合治疗，并且激活状态和细胞因子的CD8，CD8，CD4，CD4，CD4和NK细胞的产生在每个条件下的抑制剂和NK的NK细胞中，以及矩阵的均变化。揭示。最后，通过从骨转移局部表达RANKL的免疫细胞和给药的小鼠的正常骨髓和非剂量的免疫检查点抑制剂，进行了全面的基因表达分析，以阐明免疫检查点抑制剂对降压细胞对基因水平和分子机械性的canter ant ant ant canul the Carrient ant ant canume the Carymul the Incanty CanceRem the Carrient ant canule the Carymul-colune the Carymul-colune the Carrient canume Incanty Carymul-conare的影响的影响。分析。