口腔癌における癌幹細胞の分離・同定と同細胞を標的とした新しい診断・治療法の開発

口腔癌中癌症干细胞的分离和鉴定以及针对这些细胞的新诊断和治疗方法的开发

基本信息

批准号：
19390517
负责人：
岡本哲治
金额：
$ 12.4万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

【目的】近年、大腸癌・乳癌・肝臓癌などにおいて癌幹細胞の存在およびその特性についての解明がなされており,癌幹細胞の有力なマーカーとしてCD133抗原が考えられている.口腔扁平上皮癌の幹細胞同定とその特性の解明は、新規の診断や分子標的治療となる可能性があり,未分化細胞のまれな集団が腫瘍の形成と維持に関与することを示す証拠が増加しつつあるが、口腔扁平上皮癌においてはこのことは検討されていない.我々は口腔扁平上皮癌由来細胞株を用いて口腔扁平上皮癌における癌幹細胞の存在およびその特性について検討した。【材料および方法】口腔扁平上皮癌由来細胞株(OSCC)KO細胞を使用した.同細胞よりCD133抗体を用いてCD133陽性細胞を磁気ビーズ法にて分離し、血清を用いずに未分化性を長期間、継代・維持できる無血清培養系の確立を試みた。【結果】CD133陽性細胞数は全細胞中のわずか約0.5-0.7%であった。無血清培養下、CD133陽性細胞とCD133陰性細胞間で、単層培養系での増殖能、浮遊培養系でのスフェロイド形成能およびヌードマウスでの造腫瘍能などを比較検討した結果、無血清培養下、CD133陽性細胞は浮遊培養系で高いスフェロイド形成能を示したが、陰性細胞はスフェロイドをまったく形成しなかった。一方、単層無血清培養系ではCD133陰性細胞は高い増殖能を示したが、CD133陽性細胞の増殖能は非常に低く、また細胞接着因子などの基質特異性も異なった。そこで、スフェロイド形成能を持たないCD133陰性細胞にCD133陽性細胞をわずか0.5%-1%の比率で混合したところ、高いスフェロイド形成能を示した。また、スフェロイド形成細胞は、わずか1000個の細胞数でヌードマウス背部皮下移植系において腫瘍を形成し、さらにES細胞などの未分化マーカーであるOCT4やALP分子を発現していた。これらの結果から、CD133陽性細胞由来のスフェロイド形成細胞は、幹細胞としての性格を有していることが強く考えられた。

[目的]近年来，在结肠，乳腺癌和肝癌中已经阐明了癌症干细胞的存在和特征，CD133抗原被认为是癌症干细胞的重要标志。口腔鳞状细胞癌中干细胞的鉴定及其特征的阐明可能是一种新型的诊断或分子靶向治疗，并且越来越多的证据表明，未分化的细胞的罕见种群参与肿瘤形成和维持，但在口腔鳞状细胞癌中尚未研究。我们使用源自口服鳞状细胞癌的细胞系研究了癌症干细胞在口服鳞状细胞癌中的存在和特征。 [材料和方法]使用了口服鳞状细胞癌的细胞癌（OSCC）KO细胞。使用磁珠方法将CD133阳性细胞与相同细胞分离，并尝试建立一个无血清的培养系统，该系统可以长时间不使用血清而在很长一段时间内通过并维持未分化。结果：CD133阳性细胞的数量仅为所有细胞的0.5-0.7％。我们比较并检查了CD133阳性细胞和CD133阴细胞在无血清培养中的生长潜力，在悬浮培养中的球体形成能力以及裸鼠中的肿瘤形成能力以及其他研究表明，CD133333333333333333333333的生长能力表明，在悬浮型细胞中，CD133-阳性细胞在悬浮型中表现出高度的悬浮剂培养物，而在任何悬浮剂中都表现出了任何悬浮剂的培养。另一方面，在单层无血清培养系统中，CD133阴性细胞具有很高的增殖能力，但是CD133阳性细胞具有非常低的增殖能力，底物特异性（例如细胞粘附因子）也有所不同。因此，当CD133阳性细胞与没有球体形成能力的CD133阴细胞以仅0.5％-1％的比例混合时，它们显示出高球体形成能力。此外，球体形成的细胞在裸小鼠的背皮下植入系统中形成肿瘤，仅具有1,000个细胞，还表达了Oct4和ALP分子，它们是未分化的标记，例如ES细胞。这些结果强烈表明，源自CD133阳性细胞的球体形成细胞具有干细胞的特征。

项目成果

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专利数量（0）

Review article : Chemically defined serum-free culture for mouse embryonic stem cells

评论文章：小鼠胚胎干细胞的化学成分确定的无血清培养物

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Tissue Culture Research Communications Vol. 27, No. 3
影响因子：
0
作者：
Y. Hayashi;MK Furue;Y. Myoishi;T. Okamoto
通讯作者：
T. Okamoto

Coincident two mutations and one single nucleotide polymorphism of the PTCH1 gene in a family with naevoid basal cell carcinoma syndrome.

一个患有痣样基底细胞癌综合征的家系中 PTCH1 基因的两个同时突变和一个单核苷酸多态性。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Acta Derm Venereol.
影响因子：
0
作者：
Yan Z;Okamoto T,Tokura Y. 他4名
通讯作者：
Okamoto T,Tokura Y. 他4名

口腔癌に対する細胞治療 : 基礎研究から臨床研究へ

口腔癌细胞治疗：从基础研究到临床研究

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Antoku Y;Hashimoto K;Kuwahara S;Yamanokuchi T;Torata N;Yamashita T;Okamura K;Nakashima N;Shimizu S :;Y.Karuno;岡本哲治
通讯作者：
岡本哲治

Developmental signaling Disorders in Craniofacial Anomalies and Cancers

颅面异常和癌症中的发育信号障碍