FGF、FGF結合蛋白およびFGF受容体を標的とした扁平上皮癌の分子標的治療

针对FGF、FGF结合蛋白和FGF受体的鳞状细胞癌分子靶向治疗

基本信息

批准号：
13218084
负责人：
岡本哲治
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究目的:扁平上皮癌の増殖・浸潤・血管新生に重要な働きをしていると考えられるFGF, FGF結合蛋白HBp17およびFGF受容体の発現を蛋白および遺伝子レベルで検討すると共にFGFR遺伝子のチロシンキナーゼ領域の変異を検討し,血管新生,転移,予後との関連を明らかにする。さらに,これら遺伝子のアンチセンスDNAを扁平上皮癌細胞に導入し扁平上皮癌の分子標的診断・治療の可能性を探求する。要約:唾液腺癌細胞に野生型KGFR遺伝子を導入すると,in vitroでの増殖能は著しく低下し,アミラーゼやラクトフェリンの発現上昇およびアポトーシスが誘導された。また,ヌードマウス背部皮下移植KGFR導入唾液腺癌細胞の増殖も低下し,一部のクローンでは造腫瘍性を失ったことから,FGF受容体遺伝子を標的としたヒト唾液腺癌の遺伝子治療の有用性が強く示唆された。また,71症例中44症例(62%)の口腔SCCにFGFR3の2128番目の塩基グアニンのチミンへの変異(G2128T変異)を認め,同変異は697番目のコドンglycinのcystineへのアミノ酸置換(G697C)を示唆した。また,免疫組織学的検討の結果,変異を有する症例では,FGFR3蛋白の細胞膜での過剰発現を認めたが,変異のない症例では,FGFR3は細胞質および核に局在し,その発現強度は変異症例と比較して低下していた。さらに,遺伝子組み替えWTおよびMT-FGFR3-TK蛋白のリン酸化活性を比較した結果,MTではWTに比べてTKリン酸化活性が上昇していることが明らかとなった。考察:FGFsは口腔扁平上皮癌の自己増殖促進因子・血管新生因子として機能していること,HBp17/FGFBPはFGFの活性化や扁平上皮の癌化と密接に関与していること,さらに,口腔癌においてFGFRのチロシンキナーゼ領域の変異を伴う機能異常が存在することが強く予想された。したがって,上記分子・遺伝子は口腔癌の自己増殖能のみならず血管新生能にも密接に関係した分子標的と考えられた。

研究目的：检测在鳞状细胞癌的增殖、侵袭和血管生成中发挥重要作用的FGF、FGF结合蛋白HBp17和FGF受体在蛋白和基因水平上的表达以及我们将检查 FGFR 基因的酪氨酸激酶的区域变异并阐明它们与血管生成、转移和预后的关系。此外，我们还将把这些基因的反义DNA导入鳞状细胞癌细胞中，探索鳞状细胞癌分子靶向诊断和治疗的可能性。摘要：将野生型KGFR基因导入唾液腺癌细胞后，其体外增殖能力显着降低，淀粉酶和乳铁蛋白表达增加，诱导细胞凋亡。此外，皮下移植到裸鼠背部的引入KGFR的唾液腺癌细胞的增殖也减少，并且一些克隆失去了致瘤性，这表明针对FGF受体基因的人类唾液腺癌基因治疗的有效性。建议。此外，71例口腔鳞状细胞癌中，有44例（62%）在FGFR3第2128位碱基处出现鸟嘌呤突变为胸腺嘧啶（G2128T突变），而这种突变是由第697位碱基甘氨酸替换为胱氨酸引起的。建议密码子（G697C）。另外，免疫组织学检查结果显示，在有突变的情况下，在细胞膜中观察到FGFR3蛋白的过度表达，而在没有突变的情况下，FGFR3定位在细胞质和细胞核中，并且由于FGFR3蛋白的表达强度降低，导致其表达强度降低。与病例相比较低。此外，重组WT和MT-FGFR3-TK蛋白的磷酸化活性的比较表明，与WT相比，MT中的TK磷酸化活性增加。讨论：FGFs在口腔鳞状细胞癌中作为自身生长促进因子和血管生成因子发挥作用，HBp17/FGFBP与FGF激活和鳞状细胞癌密切相关，并且强烈预测功能异常与酪氨酸激酶区域突变相关FGFR 存在于癌症中。因此，上述分子和基因被认为是不仅与口腔癌的自我增殖能力而且与血管生成能力密切相关的分子靶点。