細胞核初期化の分子基盤

核重编程的分子基础

基本信息

批准号：
18390086
负责人：
山中伸弥
金额：
$ 10.39万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18390086/
关键词：
分化多能性初期化再生医学

项目摘要

研究目的私たちは最近、4つの転写因子を組み合わせてレトロウイルスで導入することにより、マウス胎児線維芽細胞から、ES細胞に類似した多能性幹細胞であるiPS(induced pluripotent stem)細胞を樹立することに成功した。本研究においては、初期化の分子基盤を理解するとともに、ヒト分化細胞からiPS細胞を樹立することを目的に、次の研究を行った。研究結果本年度は次の項目の研究を行う。1.ヒト体細胞からのiPS細胞樹立マウスで同定した4因子をヒト線維芽細胞に導入し、iPS細胞の樹立を試みたが、これまでのところ成功していない。ヒト細胞においては、他の因子も必要である可能性が示唆された。2.ファミリー因子によるiPS細胞の樹立マウスで同定した4因子(Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4)にはそれぞれ複数のファミリー蛋白質が存在している。これらファミリー蛋白質によってもiPS細胞が樹立できるかを解析した。これまでにSox1やSox3でもiPS細胞が樹立できることが明らかとなった。3.アデノウイルスによるiPS細胞の樹立しかしレトロウイルスは染色体に取り込まれ周囲の遺伝子を活性化する可能性があり、安全性において問題がある。そこでアデノウイルスによる一過性発現でのiPS細胞樹立を試みたが、これまでのところ成功していない。4.レトロウイルスの挿入部位の決定4因子のレトロウイルスが感染した線維芽細胞の中でiPS細胞となるのは1%以下である。これはレトロウイルス挿入による5番目の因子の活性化が必須である可能性を示唆している。そこで複数のiPS細胞クローンにおけるレトロウイルス挿入部位を解析し、一部については挿入部位を決定した。

研究目的我们最近通过逆转录病毒引入四种转录因子的组合，从小鼠胎儿成纤维细胞中建立了类似于 ES 细胞的多能干细胞 iPS（诱导多能干细胞）。在本研究中，我们进行了以下研究，旨在了解从人类分化细胞中重编程和建立 iPS 细胞的分子基础。研究成果今年，我们将开展以下几项研究。 1.从人体细胞建立iPS细胞我们试图通过将在小鼠中鉴定的四种因子引入人成纤维细胞来建立iPS细胞，但到目前为止我们还没有成功。有人提出，人类细胞中可能还需要其他因素。 2.利用家族因子建立iPS细胞在小鼠中鉴定的四个因子(Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4)中的每一个都具有多个家族蛋白。我们分析了是否可以使用这些家族蛋白建立 iPS 细胞。到目前为止，已经表明可以使用Sox1和Sox3建立iPS细胞。 3.利用腺病毒建立iPS细胞然而，逆转录病毒有可能掺入染色体并激活周围基因，因此存在安全问题。因此，我们尝试使用腺病毒通过瞬时表达来建立iPS细胞，但到目前为止我们还没有成功。 4.逆转录病毒插入位点的确定感染四种逆转录病毒的成纤维细胞中只有不到1%成为iPS细胞。这表明通过逆转录病毒插入激活第五个因子可能是必要的。因此，我们分析了多个 iPS 细胞克隆中的逆转录病毒插入位点，并确定了其中一些克隆的插入位点。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Transcriptional repression and DNA hypermethylation of a small set of ES cell marker genes in male germline stem cells.

DOI：
10.1186/1471-213x-6-34
发表时间：
2006-07-21
期刊：
BMC developmental biology
影响因子：
0
作者：
Imamura M;Miura K;Iwabuchi K;Ichisaka T;Nakagawa M;Lee J;Kanatsu-Shinohara M;Shinohara T;Yamanaka S
通讯作者：
Yamanaka S

体細胞培養から誘導される人工万能幹細胞

来自体细胞培养的人工多功能干细胞