胚性幹(ES)細胞の自己複製と分化における転写因子ネットワーク解析

胚胎干细胞自我更新和分化的转录因子网络分析

基本信息

批准号：
16013232
负责人：
山中伸弥
金额：
$ 4.48万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16013232/
关键词：
分化多能性ホメオボックス DNAマイクロアレー網羅的解析

项目摘要

胚性幹細胞(ES細胞)は哺乳類の初期胚(胚盤胞)に由来する幹細胞で、様々な細胞へと分化する能力(分化多能性)を維持したまま、半永久的に増殖する。未分化のまま増殖を繰り返す姿は単細胞生物を連想させる。これまでにES細胞は恒常活性型のRas蛋白質であるERasを特異的に発現していること、さらにホメオボックス転写因子Nanogは分化多能性の維持に必須であるを報告してきた。ES細胞の特性はNanogを含む複数の転写因子による相互作用により決定されると考えられる。本年度の研究目的はNanogの発現を規定する転写因子、Nanogと複合体を形成する転写因子因子、そしてNanogにより転写調節される標的遺伝子を同定することであった。1.Nanog遺伝子の調整領域の解明レポーター遺伝子解析によりNanog遺伝子が未分化ES細胞特異的に発現するのに必要なエンハンサー領域を同定した。またSox2とOct4の2つの転写因子がこの領域に結合することを見いだした。2.Nanogの標的遺伝子探索未分化状態がSTAT3により維持されているES細胞と、Nanogにより維持されている細胞との間で、DNAマイクロアレー解析を行った。その結果、NanogとSTAT3が調節していると考えられる標的遺伝子を複数同定した。3.Nanogの複合体解析Nanogは他の転写調節因子やクロマチン修飾因子と複合体を形成する可能性がある。そこでNanogと結合する蛋白因子の精製をアフィニティー精製により試みた。現在のところ、特異的にNanogと結合する蛋白質は同定できていない。

胚胎干细胞（ES细胞）是从早期的哺乳动物胚胎（胚泡）衍生出的干细胞，该干细胞是半渗透的，同时保持分化为各种细胞的能力（多能分化）。重复的增殖虽然仍未分化，这让人联想到单细胞生物。迄今为止，ES细胞已特别表达ERA，即一种同源的RAS蛋白，并且同型转录因子Nanog对于维持分化多能是必不可少的。 ES细胞的特性被认为是由包括Nanog在内的多个转录因子的相互作用确定的。今年研究的目的是确定定义纳米表达的转录因子，与纳米的复合物形成复合物的转录因子以及受Nanog在转录调控的靶基因。 1。通过记者基因分析阐明了纳米基因的调节区域，鉴定了在未分化的ES细胞中特异性表达的纳米基因所需的增强子区域。我们还发现，SOX2和OCT4的两个转录因子与该区域结合。 2。在ES细胞之间进行了DNA微阵列分析，在该细胞中，STAT3和维持NANOG的细胞维持了对Nanog的靶基因搜索。结果，确定了被认为受Nanog和STAT3调控的多个靶基因。 3。纳米复合物分析Nanog可能与其他转录调节剂和染色质修饰符形成复合物。因此，通过亲和力纯化尝试了结合Nanog的蛋白质因子的纯化。目前，尚未鉴定出尚未鉴定出与Nanog专门结合的蛋白质。