正常型プリオン蛋白質を介した細胞内寄生菌のマクロファージ内侵入および増殖機構

正常朊病毒蛋白介导细胞内寄生菌侵入巨噬细胞并增殖的机制

基本信息

批准号：
16790250
负责人：
度会雅久
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞内寄生菌はファゴソームとリソソームの融合を阻止することによってマクロファージ内で増殖するものと考えられている。このメカニズムは未だ不明な点が多いが、申請者のこれまでのブルセラ菌を用いた実験により、菌の細胞侵入時におけるマクロファージ表層に存在する分子の選別が重要であることが示された。ブルセラ菌を含むファゴソームにはリピドラフトの構成分子が集積し、膜貫通型蛋白質が排除される。我々の研究と同時期に細菌以外のウイルス、原虫の感染にもリピドラフトの関与が示唆されている。そこで本研究ではリピドラフトが微生物感染におけるゲートウェイとしての機能を持つという仮説を立て、これを実験的に立証し、そこから得られた成果を基盤にした新たな感染防御法の構築を模索した。具体的には、ブルセラ菌の産生する病原因子が宿主細胞に及ぼす作用を解析し、菌のマクロファージ内増殖のメカニズムの解明を試みた。ブルセラ属菌に対するマクロファージ上のレセプターはいくつか存在すると考えられる。本研究ではSR-AがB.abortusのLPSに対するレセプターとしての役割を持つことが示された。また、B.abortusのLPSはネズミチフス菌のLPSと抗原性は異なるが、SR-Aとの結合様式に関しては類似性が認められた。SR-Aを介した細胞内シグナル伝達機構は不明な点が多い。膜貫通型蛋白質として知られるSR-Aが菌の感染時にリピドラフト中に集積することから、細胞内へのシグナル伝達に何らかの役割を持つことが推測される。virB4変異株の感染では、リピドラフトにおけるSR-Aの集積が認められないことから、LPS以外の細菌側因子がSR-Aのリピドラフトへの集積に何らかの関係があると考えられた。これらのことから、細菌側の病原因子がSR-Aのリピドラフトへの集積を促進し、SR-Aを介したシグナル伝達が菌の細胞侵入および細胞内増殖に重要な役割を果たしていることが示唆された。

人们认为细胞内寄生细菌通过阻止吞噬体和溶酶体的融合在巨噬细胞内增殖。尽管该机制的许多方面仍不清楚，但申请人之前使用布鲁氏菌的实验表明，当细菌侵入细胞时，巨噬细胞表面上存在的分子的选择很重要。脂筏的组成分子在含有布鲁氏菌的吞噬体中积累，跨膜蛋白被消除。在我们研究的同时，脂筏也被认为与细菌以外的病毒和原生动物的感染有关。因此，在本研究中，我们假设脂筏在微生物感染中发挥作用，并通过实验验证了这一点，并试图根据所获得的结果构建一种新的感染预防方法。具体来说，我们分析了布鲁氏菌产生的致病因子对宿主细胞的影响，并试图阐明细菌在巨噬细胞内增殖的机制。人们认为巨噬细胞上有几种布鲁氏菌受体。这项研究表明，SR-A 在流产布鲁氏菌中发挥 LPS 受体的作用。此外，虽然流产芽孢杆菌LPS与鼠伤寒沙门氏菌LPS的抗原性不同，但与SR-A的结合模式有相似之处。 SR-A 介导的细胞内信号转导机制的许多方面仍不清楚。由于SR-A被称为跨膜蛋白，在细菌感染期间积聚在脂筏中，因此推测它在向细胞内的信号传递中发挥一定作用。在用virB4突变株感染时，没有观察到SR-A在脂筏中的积累，这表明除LPS之外的细菌因素在某种程度上参与了SR-A在脂筏中的积累。这些发现表明细菌致病因素促进了SR-A在脂筏中的积累，并且SR-A介导的信号转导在细菌细胞侵袭和细胞内增殖中发挥着重要作用。