正常型プリオン蛋白質を介した細胞内寄生菌のマクロファージ内侵入および増殖機構

正常朊病毒蛋白介导细胞内寄生菌侵入巨噬细胞并增殖的机制

基本信息

批准号：
16790250
负责人：
度会雅久
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞内寄生菌はファゴソームとリソソームの融合を阻止することによってマクロファージ内で増殖するものと考えられている。このメカニズムは未だ不明な点が多いが、申請者のこれまでのブルセラ菌を用いた実験により、菌の細胞侵入時におけるマクロファージ表層に存在する分子の選別が重要であることが示された。ブルセラ菌を含むファゴソームにはリピドラフトの構成分子が集積し、膜貫通型蛋白質が排除される。我々の研究と同時期に細菌以外のウイルス、原虫の感染にもリピドラフトの関与が示唆されている。そこで本研究ではリピドラフトが微生物感染におけるゲートウェイとしての機能を持つという仮説を立て、これを実験的に立証し、そこから得られた成果を基盤にした新たな感染防御法の構築を模索した。具体的には、ブルセラ菌の産生する病原因子が宿主細胞に及ぼす作用を解析し、菌のマクロファージ内増殖のメカニズムの解明を試みた。ブルセラ属菌に対するマクロファージ上のレセプターはいくつか存在すると考えられる。本研究ではSR-AがB.abortusのLPSに対するレセプターとしての役割を持つことが示された。また、B.abortusのLPSはネズミチフス菌のLPSと抗原性は異なるが、SR-Aとの結合様式に関しては類似性が認められた。SR-Aを介した細胞内シグナル伝達機構は不明な点が多い。膜貫通型蛋白質として知られるSR-Aが菌の感染時にリピドラフト中に集積することから、細胞内へのシグナル伝達に何らかの役割を持つことが推測される。virB4変異株の感染では、リピドラフトにおけるSR-Aの集積が認められないことから、LPS以外の細菌側因子がSR-Aのリピドラフトへの集積に何らかの関係があると考えられた。これらのことから、細菌側の病原因子がSR-Aのリピドラフトへの集積を促進し、SR-Aを介したシグナル伝達が菌の細胞侵入および細胞内増殖に重要な役割を果たしていることが示唆された。

据认为，细胞内寄生虫通过阻断吞噬体 - 溶酶体融合而在巨噬细胞内生长。尽管该机制仍然存在许多未知方面，但先前使用布鲁氏菌的实验表明，在细菌细胞侵袭细胞期间，巨噬细胞表面层中存在的分子的选择很重要。 Lipidraft的组成分子积聚在含有布鲁氏菌的吞噬体中，消除了跨膜蛋白。与我们的研究同时，有人提出脂质草稿还会导致非细菌病毒和原生动物的感染。因此，在这项研究中，我们假设脂质草稿可以作为微生物感染的门户，并在实验上证明了这一点，并试图根据从中获得的结果来建立一种新的感染保护方法。具体而言，我们分析了布鲁氏菌产生的致病剂对宿主细胞的作用，并试图阐明细菌巨噬细胞增殖的机理。据信，布鲁氏菌种上有几种巨噬细胞的受体。这项研究表明，SR-A作为Abortus LPS的受体起作用。此外，尽管抗原性的abortus的LP与沙门氏菌的抗原性不同，但在与SR-A的结合模式下观察到相似性。许多未知数是通过SR-A进行细胞内信号传导的机制。由于SR-A（被称为跨膜蛋白）在感染细菌后在脂质草药期间积聚，因此假定它在信号传导到细胞中具有一定作用。在感染ViRB4突变体菌株时，未观察到脂质吃水中的SR-A积累，而LPS以外的细菌因子被认为与脂质草稿中的SR-A积累有一定的关联。这些结果表明，细菌病原因子促进了SR-A积聚到脂质草药中，而SR-A介导的信号传导在细胞浸润和细胞内细胞内增殖中起着重要作用。