胎盤における自然免疫応答と流産の分子メカニズム

胎盘的先天免疫反应和流产的分子机制

基本信息

批准号：
22580333
负责人：
度会雅久
金额：
$ 1.16万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22580333/
关键词：
細胞内寄生菌胎盤感染

项目摘要

妊娠母体は非妊娠個体に比べ、免疫応答が異なっていると考えられている。胎児を体内に宿すという特殊な環境下において、新型インフルエンザ等の感染症に罹患した場合、重症化することが懸念されている。その原因として、母体における免疫応答の関与が考えられている。重症化および流産は胎盤局所および全身の免疫応答が連動して引き起こされるものと推測される。本研究は胎盤における免疫応答、特に病原細菌と栄養膜巨細胞の相互作用を中心に解析し、妊娠の維持が生体防御に与える影響を検討した。ブルセラ、リステリアは胎盤の栄養膜巨細胞(TGC)へ感染し、細胞機能を阻害することによって流産を引き起こす。我々はブルセラ、リステリアのTGCへの感染機構を分子レベルで解析するために、栄養膜幹細胞(TSC)をTGCへ分化させたin vitro実験系を確立した。ブルセラ、リステリアが妊娠母体に感染すると胎盤形成期にTh1サイトカインであるインターフェロンγ(IFN-γ)の上昇が認められる。このIFN-γの上昇を中和抗体で阻害することによって、流産を防止することができる。IFN-γの上昇によってTGCに貪食能が発揮され、活性化することが認められた。TSCがTGCへ分化することによって、種々の表面レセプターが発現することが明らかになった。次に、IFN-γの処理の有無によって表面レセプターの発現パターンに変化が生じるかどうかマイクロアレイによって検討した。その結果、Toll-like receptor2(TLR2)とクラスBスカベンジャーレセプター(SR-B)の発現が増加した。TGCの表面に発現するレセプターの報告例は全くないため、本研究ではこの2つのレセプターと細菌感染との関係を解析した。両レセプターの抗体を用いた感染阻害実験、siRNAを用いたノックダウンTGCを作製し、これに菌を感染させ、感染効率に与える影響を解析したところ、これらのレセプターの機能阻害および発現低下により菌の感染が阻害された。以上の結果から、SR-Bが細菌の取り込みに関与していることが示唆された。また、TLR2は細菌のペプチドグリカン、ポリペプチドを認識することが知られている。TLR2が病原細菌を認識し、そのシグナル伝達によってTGCが取り込み能を発揮するものと推察された。これらの成果から、重症化および流産は胎盤局所および全身の免疫応答が連動して引き起こされるものと考えられた。

人们认为怀孕的母亲的免疫反应与非妊娠个体不同。人们担心如果在体内包含胎儿的特殊环境中染上了一种新的流感或其他传染病，它将变得更加严重。这被认为是产妇体内免疫反应的参与。假定严重的疾病和流产是由胎盘中局部和全身免疫反应的联系引起的。这项研究的重点是胎盘中的免疫反应，尤其是致病细菌与滋养细胞巨细胞之间的相互作用，并检查了维持妊娠对生物防御的影响。布鲁氏菌和李斯特菌感染胎盘滋养细胞巨细胞（TGC），并通过抑制细胞功能引起流产。我们已经建立了一个体外实验系统，其中将滋养层干细胞（TSC）分化为TGC，以分析分子水平的布鲁氏菌和李斯特菌的感染机制。当布鲁氏菌和李斯特菌感染怀孕的母亲时，在胎盘形成期间观察到Th1细胞因子干扰素γ（IFN-γ）的增加。通过用中和抗体抑制IFN-γ的增加，可以防止流产。发现TGC的吞噬作用能力被IFN-γ的升高施加并被激活。据揭示，TSC分化为TGC会导致各种表面受体的表达。接下来，我们通过微阵列研究了IFN-γ的处理是否会导致表面受体的表达模式变化。结果，提高了Toll样受体2（TLR2）和B类清除剂受体（SR-B）的表达。由于未报告在TGC表面表达的受体，因此该研究分析了这两种受体与细菌感染之间的关系。使用来自两种受体的抗体，敲低TGC的抑制实验，使用siRNA制备敲低TGC，并用细菌感染，并分析了它们对感染效率的影响。通过抑制这些受体的功能和降低表达来抑制细菌的感染。以上结果表明SR-B参与细菌摄取。此外，已知TLR2可以识别细菌肽糖和多肽。据估计，TLR2识别致病细菌，并且TGC通过信号传导施加其摄取能力。这些结果表明，严重性和流产是由胎盘中局部和全身免疫反应的联系引起的。