胎盤における自然免疫応答と流産の分子メカニズム

胎盘的先天免疫反应和流产的分子机制

基本信息

批准号：
22580333
负责人：
度会雅久
金额：
$ 1.16万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22580333/
关键词：
細胞内寄生菌胎盤感染

项目摘要

妊娠母体は非妊娠個体に比べ、免疫応答が異なっていると考えられている。胎児を体内に宿すという特殊な環境下において、新型インフルエンザ等の感染症に罹患した場合、重症化することが懸念されている。その原因として、母体における免疫応答の関与が考えられている。重症化および流産は胎盤局所および全身の免疫応答が連動して引き起こされるものと推測される。本研究は胎盤における免疫応答、特に病原細菌と栄養膜巨細胞の相互作用を中心に解析し、妊娠の維持が生体防御に与える影響を検討した。ブルセラ、リステリアは胎盤の栄養膜巨細胞(TGC)へ感染し、細胞機能を阻害することによって流産を引き起こす。我々はブルセラ、リステリアのTGCへの感染機構を分子レベルで解析するために、栄養膜幹細胞(TSC)をTGCへ分化させたin vitro実験系を確立した。ブルセラ、リステリアが妊娠母体に感染すると胎盤形成期にTh1サイトカインであるインターフェロンγ(IFN-γ)の上昇が認められる。このIFN-γの上昇を中和抗体で阻害することによって、流産を防止することができる。IFN-γの上昇によってTGCに貪食能が発揮され、活性化することが認められた。TSCがTGCへ分化することによって、種々の表面レセプターが発現することが明らかになった。次に、IFN-γの処理の有無によって表面レセプターの発現パターンに変化が生じるかどうかマイクロアレイによって検討した。その結果、Toll-like receptor2(TLR2)とクラスBスカベンジャーレセプター(SR-B)の発現が増加した。TGCの表面に発現するレセプターの報告例は全くないため、本研究ではこの2つのレセプターと細菌感染との関係を解析した。両レセプターの抗体を用いた感染阻害実験、siRNAを用いたノックダウンTGCを作製し、これに菌を感染させ、感染効率に与える影響を解析したところ、これらのレセプターの機能阻害および発現低下により菌の感染が阻害された。以上の結果から、SR-Bが細菌の取り込みに関与していることが示唆された。また、TLR2は細菌のペプチドグリカン、ポリペプチドを認識することが知られている。TLR2が病原細菌を認識し、そのシグナル伝達によってTGCが取り込み能を発揮するものと推察された。これらの成果から、重症化および流産は胎盤局所および全身の免疫応答が連動して引き起こされるものと考えられた。

人们认为怀孕的母亲与非怀孕的母亲有不同的免疫反应。有人担心，在体内怀有胎儿的特殊环境下，如果人感染新型流感等传染病，病情可能会变得更加严重。其原因被认为是与母亲体内的免疫反应有关。据认为，病情加重和流产是由胎盘局部和全身免疫反应共同引起的。在本研究中，我们分析了胎盘中的免疫反应，重点关注致病菌与滋养层巨细胞之间的相互作用，并研究了妊娠维持对生物防御的影响。布鲁氏菌和李斯特菌感染胎盘的滋养层巨细胞（TGC）并抑制细胞功能，导致流产。我们建立了滋养层干细胞（TSC）分化为TGC的体外实验系统，以从分子水平分析布鲁氏菌和李斯特菌感染TGC的机制。当怀孕的母亲感染布鲁氏菌或李斯特菌时，在胎盘植入过程中会观察到干扰素-γ (IFN-γ)（一种 Th1 细胞因子）的增加。通过使用中和抗体抑制 IFN-γ 的增加，可以预防流产。据观察，IFN-γ的增加对TGC发挥吞噬能力并激活它们。研究表明，当 TSC 分化为 TGC 时，会表达多种表面受体。接下来，我们使用微阵列来检查表面受体的表达模式是否根据 IFN-γ 处理的存在或不存在而变化。结果，Toll样受体2（TLR2）和B类清道夫受体（SR-B）的表达增加。由于目前还没有TGC表面表达受体的报道，本研究分析了这两种受体与细菌感染的关系。使用针对两种受体的抗体进行感染抑制实验，使用siRNA进行敲低TGC，用其感染细菌，并分析对感染效率的影响。上述结果表明SR-B参与了细菌的摄取。此外，TLR2 已知可识别细菌肽聚糖和多肽。推测TLR2识别病原菌，TGC通过信号转导发挥其摄取能力。基于这些结果，人们认为严重加重和流产是由胎盘局部和全身免疫反应共同引起的。