がん細胞の特性を決定する細胞骨格異常の生化学的解析

确定癌细胞特征的细胞骨架异常的生化分析

基本信息

项目摘要

1-1.細胞がん化による動的接着部位の変化とアクチン結合蛋白質の局在変化の相関を解析した(祖父江)。1-2.ラディキシンは接着装置を構成する蛋白質であるが、110kDの膜蛋白質と結合していることを、共免疫沈澱法によって示した。さらに。110kD膜蛋白質に対するモノクローン抗体を作成した(月田)。2.pp60^<v-src>の分子成熟に関与するアクチン結合能をもつストレス蛋白質HSP90の構造と機能がカルモデヂュリンによって調節を受ける仕組みを、カルモデュリン結合ドメインの同定によって推定した(矢原)。3.RSV温度感受性変異株tsNY68を感染させた細胞を使って、許容温度ではカドヘリン・カテニンがチロシンリン酸化を受けており、そのため細胞凝集しないとしう結論を裏付ける結果を得た(浜口)。4.cdc2キナーゼによって中間フィラメントの構築が細胞周期依存的に調節されているが、リン酸化部位の同定を行った(稲垣)。5.マウス白血病M1細胞の分化のともなって発現するビメンチン遺伝子のプロモーター領域のシス因子とそれに結合する転写因子を解析し、分化に先だって活性化される転写因子の存在を認めた(永田)。6.ラット繊維芽細胞3Y1をRSVで形質転換すると、mRNA量でみたカルパクチンIの重鎖(p36)と軽鎖(p11)の発現の増大を認めた(崎山)。7.M期に活性化される微小管切断因子の活性がMPFによって制御されていることをアフリカツメガエル無細胞系を用いて証明した(酒井)。
1-1.我们分析了动态粘附位点的变化与细胞癌变引起的肌动蛋白结合蛋白的定位变化之间的相关性(Sobue)。 1-2. Radixin是构成粘附装置的蛋白质,我们通过免疫共沉淀表明它与110kD的膜蛋白结合。而且。创建了针对 110kD 膜蛋白的单克隆抗体 (Tsukita)。 2. HSP90是一种具有肌动蛋白结合能力的应激蛋白,参与pp60^<v-src>的分子成熟,通过钙调蛋白结合结构域的鉴定,推导了HSP90的结构和功能受钙调蛋白调节的机制(Yahara )。 3. 使用感染 RSV 温度敏感突变株 tsNY68 的细胞,我们获得的结果支持以下结论:钙粘蛋白和连环蛋白在允许的温度下被酪氨酸磷酸化,因此不会聚集(Hamaguchi)。 4.中间丝的构建受到CDC2激酶以细胞周期依赖性方式调节,并且我们鉴定了磷酸化位点(Inagaki)。 5. 我们分析了小鼠白血病M1细胞分化时表达的vimentin基因启动子区的顺式元件以及与其结合的转录因子,发现存在分化前激活的转录因子(Nagata )。 6.当用RSV转化大鼠成纤维细胞3Y1时,钙肽I重链(p36)和轻链(p11)的表达在mRNA水平上增加(Sakiyama)。 7. 使用非洲爪蟾无细胞系统,我们证明了 M 期激活的微管切断因子的活性受到 MPF (Sakai) 的调节。

项目成果

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M.Nakamura: "Purification and charcterization of a vimentin-specific protease in mouse leukemia cell line." European Journal of Biochemistry. 205. 947-945 (1992)
M.Nakamura:“小鼠白血病细胞系中波形蛋白特异性蛋白酶的纯化和表征。”
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Y.Matsuoka:“两种不同的蛋白激酶在有丝分裂过程中作为神经胶质丝激酶在不同的时间段发挥作用。”
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S.Matsuda:“非洲爪蟾 MAP 激酶激活剂:作为磷酸化级联中关键中间体的鉴定和功能。”
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Sh.Tsukita: "Molecular kinkage between cadherin and actin filaments in cell-to-cell adherens junctions." Current Opinions in cell Biology. 4. 834-839 (1992)
Sh.Tsukita:“细胞间粘附连接中钙粘蛋白和肌动蛋白丝之间的分子扭结。”
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K.moriyama:“肌动蛋白丝切蛋白的肌动蛋白结合位点的突变分析以及肌动蛋白丝切蛋白和结精之间嵌合蛋白的表征。”
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    矢原 一郎

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