がん細胞の特性を決定する細胞骨格異常の生化学的解析

确定癌细胞特征的细胞骨架异常的生化分析

基本信息

批准号：
02151081
负责人：
矢原一郎
金额：
$ 12.67万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

トリ肉腫ウィルスがん遺伝子産物pp60^<vー<src>___ー>はその機能部位である細胞膜内側に運ばれるまでは、熱ショックタンパク質HSP90およびpp50と3者複合体を形成しているが、このHSP90の性質を解析した。HSP90は生理的条件下でα/αおよびβ/βホモダイマ-として存在し、アクチンに結合する。同時にかなりのβモノマ-が存在し、上記pp60^<vー<src>___ー>との複合体形成に関与すると考えられる。トリ肉腫ウィルスRSVによってがん化した細胞では、正常細胞より多量のカドヘリンが合成されているにもかかわらず、カドヘリン依存性の細胞凝集が起こらないことを見出した。RSVでがん化した細胞では、カドヘリンおよびカドヘリン結合タンパク質カテニンがチロシンリン酸化を受けていることが明らかになった。RSV各種変異株を用いて、これらのタンパク質のチロシンリン酸化と細胞がん化の関係を調べた。バナデ-ト存在下に調べると、正常靜止期細胞中のチロシンリン酸化されたタンパク質は、増殖している細胞と比較しても、必しも低くない。しかしバナデ-トを除くと、チロシンリン酸化されたタンパク質のレベルは急速に下る。したがって、正常靜止期細胞では、チロシンキナ-ゼと共にチロシンフォスファタ-ゼも同時に活性化されていることが明らかになった。AJに存在する細胞型がん遺伝子産物(チロシンキナ-ゼ活性を有する)によってチロシンリン酸化を受けるタンパク質として、アクチン結合タンパク質ラディキシンを同定した。マウス骨髄性白血病細胞M1では中間フィラメントタンパク質ビメンチンは分解を受けやすいが、分化した細胞では分解が抑制されていることを見出した。増殖刺激により活性化されるMAPキナ-ゼは、cdc2キナ-ゼの下流で作用し、微小管サイクルの調節に関与することを明らかにした。

禽肉瘤病毒致癌基因产物 pp60^<vー<src>___ー> 与热休克蛋白 HSP90 和 pp50 形成三联复合物，直到被转运到其功能位点，即细胞膜内部。热休克蛋白90。 HSP90 在生理条件下以 α/α 和 β/β 同二聚体形式存在，并与肌动蛋白结合。同时，存在大量的β单体，并被认为参与与上述pp60^<v-<src>___->形成复合物。我们发现，由于禽肉瘤病毒RSV而癌变的细胞不会发生钙粘蛋白依赖性细胞聚集，尽管它们比正常细胞合成更多的钙粘蛋白。研究发现，在 RSV 感染的细胞中，钙粘蛋白和钙粘蛋白结合蛋白连环蛋白被酪氨酸磷酸化。使用各种 RSV 突变株，我们研究了这些蛋白质的酪氨酸磷酸化与细胞癌变之间的关系。当在钒酸盐存在的情况下进行检查时，正常静止细胞中的酪氨酸磷酸化蛋白质不一定低于增殖细胞中的蛋白质。然而，当钒酸盐被去除后，酪氨酸磷酸化蛋白的水平迅速下降。因此，表明在正常静止细胞中酪氨酸磷酸酶与酪氨酸激酶同时被激活。我们鉴定出肌动蛋白结合蛋白 radixin 是一种通过 AJ 中存在的细胞型癌基因产物（具有酪氨酸激酶活性）进行酪氨酸磷酸化的蛋白质。我们发现中间丝蛋白波形蛋白在小鼠骨髓白血病细胞M1中容易被降解，但在分化细胞中降解受到抑制。我们发现，通过增殖刺激激活的 MAP 激酶作用于 CDC2 激酶的下游，并参与微管周期的调节。