落葉状天疱瘡をモデルとした表皮上層細胞接着構造蛋白のリン酸化と接着制御機構の解析

以落叶型天疱疮模型分析表皮上层细胞粘附结构蛋白磷酸化及粘附控制机制

• 批准号: 14770401
• 负责人: 江崎 智香子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770401/
• 关键词: 自己免疫性水疱; 尋常性天疱瘡; 落葉状天疱瘡; ケラチノサイト; デスモソーム; リン酸化; 自己免疫性水疱症

本研究は、抗原蛋白デスモグレイン(Dsg)1の表皮でのDsg3との発現量と局在の差により尋常性天疱瘡との臨床症状の差が説明されている落葉状天疱瘡(PF)をモデルに、細胞骨格・接着分子の機能解析を目的とする。ヒト有棘細胞癌由来株DJM-1細胞ではDsg1の発現量が不十分であったため、本年度は正常ヒト角化細胞(NHK)のカルシウム濃度依存性分化系モデル(カルシウム濃度0.09→1.8mMシフトによる角化モデル)を用いて検討を進めた。0.09mMが表皮下層の、1.8mMが上層環境のモデルであるが、Dsg1は0.09mM下でも存在し、カルシウムシフト4日後には逆に減少、一方Dsg3は1.8mMへのシフト1日後より増加し、Dsg3は表皮下層で優位、Dsg1は上層で優位とするin vivoでの見解と異なり、臨床症状の差は量の差のみに依らない可能性を示唆する。またデスモコリン3はシフト1日後に109KDから100KDに変化した上で2日後から減少し、Dsg1,3以外の細胞接着構造蛋白の影響を示唆する。NHK細胞は培養で増殖添加剤としてハイドロコーチゾンを使用し、10^<-9^〜>10^<-5>Mの範囲では上記の結果に明らかな差はなかったが水疱症の治療薬であるステロイドの影響は考慮に値する。天疱瘡患者でELISA法を用いて測定した抗Dsg1,3抗体の抗体価の推移と治療薬と臨床経過の関連を詳細に観察し、治療途中では必ずしも抗体価の上昇に臨床症状の再燃が並行しないこともあり(ACD-JDA Joint Meeting2003年9月発表、稀少難治性皮膚疾患に関する調査研究班平成15年度第2回総会2004年3月発表)、ステロイドやその他の治療薬の影響で表皮細胞に病因自己抗体不応の状態が誘導される可能性が臨床面から示唆され、今後これらの薬剤を添加した培養環境での検討により臨床と直結した研究に発展すると考えた。

这项研究的目的是使用落后的Pemphigus dulgaris（PF）分析细胞骨架和粘附分子的功能分析，这解释了由于表达水平的差异和抗原蛋白毒蛋白（DSG）的局部性差异，而Pemphigus vulgaris的临床症状差异（DSG）与DSG3中的抗原蛋白（DSG）1。由于DSG1表达水平不足以在人类鳞状细胞癌衍生的DJM-1细胞中，今年我们使用钙浓度依赖性人角质形成细胞（NHK）（角质形成素模型的钙浓度从0.09转移到1.8 mm）的钙浓度依赖性分化模型（NHK）研究了结果。与体内观点不同的是，0.09mm是皮下模型，1.8mm是上层环境的模型，但是DSG1即使在0.09mm之下也存在，相反，DSG3转移4天后会减少DSG3，而DSG3转移4天后，而DSG3转移1天后，DSG3在1.8mm后的DSG3在1.8毫米中的差异为差异，则在临床上占据了Inperialter in in率的范围，在限制的范围内，是占主导地位的象征。仅差异。 Desmocholin 3也从109KD变为100KD，一天转移并从2天开始减少，这表明细胞粘附结构蛋白除DSG1和3。NHK细胞在培养中使用氢化皮质蛋白蛋白作为培养物的生长添加剂，并且在上面的结果中没有明显的差异，对10^<-9^<-9^<-9^^<-9^<-9^<-10^<-5^<-5> 5> 5> 5> 5> 5> m的影响，考虑。我们详细观察了使用ELISA方法在Pemphigus和临床过程中使用ELISA方法测量的抗DSG1,3抗体的抗体滴度之间的关系，并且因为抗体滴度的上升不一定会导致临床症状的平行症状，治疗期间（ACD-JDA联合会在2003年9月2日，2003年2003年2月2日），2003年2003年2月2日，2003年2月2日，2003年2月2日，2003年2月2日，2003年2月2日，2003年2月2日，2003年均可导致临床症状。从临床角度提出的是药物），类固醇和其他治疗药物的作用可能诱导表皮细胞中难治性自身抗体难治状态，我们认为在培养环境中添加的培养环境中的研究将发展为直接的临床研究。