デスモグレインのリコンビナニト蛋白を用いた天疱瘡の抗原解析

使用桥粒芯糖蛋白重组蛋白进行天疱疮抗原分析

• 批准号: 07770695
• 负责人: 大畑 恵之
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770695/
• 关键词: デスモグレイン; 尋常性天疱瘡抗原; 落葉状天疱瘡抗原; リコンビナイト蛋白; 免疫ブロット法

尋常性天疱瘡(PV)、落葉状天疱瘡(PF)の主要自己抗原であるデスモグレイン3(Dsg3)、デスモグレイン1(Dsg1)の細胞質内(IC)・細胞外(EC)ドメインに対するcDNAをそれぞれPCR法にて増幅し、それぞれリコンビナント蛋白を作製した。これらを抗原として教室内・国内外の天疱瘡群患者103例(尋常性天疱瘡[PV]34例、落葉状天疱瘡[PF]21例、ブラジル天疱瘡[BPF]19例、PVとPFの移行・合併例[PV/PF]8例、増殖性天疱瘡[PVeg]8例、疱診状天疱瘡[PH]4例、paraneoplasitc pemphigs[PNP]9例)と、コントロールとして類天疱瘡(BP)7例、正常人(N)血清との反応を免疫ブロット法を用いて検索した。Dsg3ECドメインに関してはPVの全例に陽性であったほか、その他の天疱瘡群にも陽性所見が散見され、Dsg1ECドメインに関してはPV,PF,BPF,PV/PFで陽性であった。これはヒト表皮抽出物を抗原とした免疫ブロット法よりもやや感度が高かった。Dsg3ICドメインに関してはPV,PFの10から20%に陽性で、PV/PFでは約半数に陽性所見が得られたが、他の天疱瘡群では陽性で、特異性が高いと考えられた。一方、Dsg1ICは各疾患に数例ずつ陽性所見が得られたことより、非特異的な反応の可能性も考えられた。ヒトデスモグレインICに対する天疱瘡群血清の反応性についてはこれまでに報告がないが、今回の研究で特にDsg3ICに関してはPV/PFに陽性率が高いことがわかり、病型の移行・合併において細胞質内蛋白に対する自己抗体が発症に関与している可能性が示唆された。今後、同一症例での異なった時期における血清中の自己抗体の推移についてさらに検討を加えてゆきたい。

使用 PCR 方法扩增了桥粒芯糖蛋白 3 (Dsg3) 和桥粒芯糖蛋白 1 (Dsg1) 的胞质内 (IC) 和胞外 (EC) 结构域，它们是寻常型天疱疮 (PV) 和落叶型天疱疮 (PF) 的主要自身抗原。生产重组蛋白。使用这些抗原，我们在课堂和国内外测试了103例天疱疮组患者（34例寻常型天疱疮[PV]、21例落叶型天疱疮[PF]、19例巴西天疱疮[BPF]、8例PV和PF）。复杂病例[PV/PF]、增生性天疱疮[PVeg]8例、天疱疮[PH]4例、副肿瘤性天疱疮采用免疫印迹法研究类天疱疮[PNP]（9例）和7例对照类天疱疮（BP）与正常人（N）血清之间的反应。 Dsg3EC 结构域在所有 PV 病例中均呈阳性，在其他天疱疮组中也发现了阳性结果，Dsg1EC 结构域在 PV、PF、BPF 和 PV/PF 中呈阳性。这比使用人表皮提取物作为抗原的免疫印迹稍微敏感一些。关于Dsg3IC结构域，10%~20%的PV和PF病例呈阳性，约一半的PV/PF病例呈阳性，但在其他天疱疮组中也呈阳性，被认为具有高度特异性。另一方面，由于Dsg1IC在每种疾病的多个病例中获得阳性结果，因此考虑非特异性反应的可能性。天疱疮组血清对人桥粒芯糖蛋白 IC 的反应性尚未见报道，但本研究发现 Dsg3IC 在 PV/PF 中阳性率较高，且胞质内蛋白的自身抗体可能参与了天疱疮的发病。这种疾病。今后我们希望进一步研究同一病例不同时间血清自身抗体的变化情况。