尋常性および落葉状天疱瘡抗原遺伝子の表皮特異的発現調節機構の解析

寻常型天疱疮和落叶型天疱疮抗原基因表皮特异性表达调控机制分析

• 批准号: 07670927
• 负责人: 玉井 克人
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07670927/
• 关键词: 尋常性天疱瘡抗原; 類天疱瘡抗原; 自己免疫性水疱症; デスモゾーム; ヘミデスモゾーム; 転写調節因子; 組織特異的発現; 落葉状天疱瘡抗原; 自己免疫性水泡症

1.類天疱瘡抗原遺伝子(BPAG1)ヒト培養ケラチノサイトに活性型ビタミンD_3(VitD3)を種々の濃度で添加し、種々の時間インキュベートした後にRNAを抽出し、Northern blotting法及びCATアッセイ法にてBPAG1の発現を検討した。その結果、BPAG1mRNAは、VitD3濃度依存的、時間依存的に減少した。この現象はcycloheximideの同時添加により変化しないため、de-novoの蛋白合成を介さず、既に細胞内に存在する分子機構によることが示された。BPAG1プロモーター・CATプラスミドをトランスフェクトした培養ケラチノサイトを用いた実験系により、このBPAG1の発現抑制は、後転写レベルで生じていることが明らかとなった。BPAG1のケラチノサイト特異的発現を調節しているcis-element、KRE2に対し、POUホメオドメイン遺伝子産物でケラチノサイトで優位に発現しているOct-11が結合し、組織特異的発現を制御していることが明らかとなった。2.ヒト尋常性天疱瘡遺伝子(Dsg3)BPAG1遺伝子と同様に、Dsg3遺伝子の発現もVitD3で制御されることが明らかとなった。BPAG1と異なり、低濃度あるいは短時間のインキュベートでは発現増加、高濃度あるいは長時間では発現抑制が観察され、in vivoにおいてもin vivoと同様に表皮細胞の分化の程度に従ってその発現動態が変化すること、すなわち未分化表皮細胞での発現亢進と、高分化表皮細胞での発現抑制が示された。

1。活性维生素D_3（VITD3）以各种浓度添加到人培养的角质形成细胞中，并在各个小时孵育后，提取RNA，并使用Northern blotting和Cat分析进行了BPAG1的表达。结果，BPAG1 mRNA以VITD3浓度依赖性和时间依赖性方式降低。这种现象不会通过同时添加环己酰亚胺而改变，并且被证明是由于细胞中已经存在的分子机制所致，而没有北诺沃蛋白的合成。使用BPAG1启动子和CAT质粒转染的培养角质形成细胞的实验系统表明，这种抑制BPAG1表达发生在后来的转录水平。据揭示，POU同源基因基因产物在角质形成细胞中主要表达的Oct-11与顺式元素KRE2结合，该KRE2调节了BPAG1的角质细胞特异性表达，并调节组织特异性表达。 2。类似于人类的Pemphigus vulgaris基因（DSG3）BPAG1基因，已经揭示了DSG3基因的表达也受VITD3的调节。与BPAG1不同，在低或短孵育时的表达增加，观察到高或长孵育时的表达抑制，并且观察到在体内高或长的体内表达抑制，并且与体内的表达相同，表达的表达动力学根据表皮细胞的分化程度而增加，表达的表达不断增加，表达不断增长，表达不断增加，并在表达中增加。分化良好的表皮细胞。

项目成果

玉井 克人: "In vivo transfer of a foreign gene to keratinocytes using the hemagglutinating virus of Japan-liposome method" J Invest Dermatol. 108. 195-199 (1997)

Katsuto Tamai：“使用日本血凝病毒-脂质体方法将外源基因体内转移至角质形成细胞”J Invest Dermatol 108. 195-199 (1997)。

玉井 克人: "Cloning of the mouse desmoglein 3 gene(DSSG) : Interspecies conservation within the cadherin superfamily" Genomics. (in press).

Katsuto Tamai：“小鼠桥粒芯糖蛋白 3 基因 (DSSG) 的克隆：钙粘蛋白超家族内的种间保护”基因组学（正在出版）。

玉井 克人: "遺伝子プロモーター研究と皮膚科学" デルマ. (印刷中).

Katsuto Tamai：“基因启动子研究和皮肤病学”Delma（正在出版）。

玉井 克人: "Compound heterozygosity for a nonsense mutation and a splice site mutation in the type VII collagen gene(COL7A1)in recessive dystrophic epidermolysis bullosa" Lab Invest. 76. 209-217 (1997)

Katsuto Tamai：“隐性营养不良性大疱性表皮松解症中 VII 型胶原基因 (COL7A1) 的无义突变和剪接位点突变的复合杂合性”Lab Invest。