間葉系幹細胞動員因子を利用した非瘢痕性創傷治癒誘導研究

使用间充质干细胞募集因子进行无疤痕伤口愈合诱导研究

• 批准号: 19659284
• 负责人: 玉井 克人
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659284/
• 关键词: 表皮水疱症; 間葉系幹細胞; 骨髄移植; 間葉系幹細胞動員; green fluorescent protein (GFP)

1)皮膚抽出液中の骨髄間葉系幹細胞動員因子探索表皮水庖症マウス皮膚再生メカニズムにおいて、骨髄由来表皮細胞および線維芽細胞が多数存在することを見出し、水庖部皮膚から骨髄由来間葉系幹細胞動員因子が放出されている可能性を考えて検討を進めた。具体的には、皮膚抽出液の間葉系幹細胞動員活性を、ボイデンチャンバー法を用いて測定した。その結果、皮膚抽出液中に極めて強い骨髄間葉系幹細胞動員活性が存在することが明らかとなった。次いで、この骨髄間葉系幹細胞動員活性を指標にして、カラムクロマトグラフィーにより動員因子の探索を進めた。最も動員活性の強い分画中に含まれる蛋白をSDS電気泳動により分離し、質量分析により動員因子候補蛋白の同定を進めた結果、3つの候補蛋白が得られた。これらの候補蛋白それぞれについて、ボイデンチャンバーを用いて間葉系幹細胞動員活性を探索し、最終的に一つの蛋白に骨髄間葉系幹細胞動員活性が存在することを明らかにした。2)骨髄間葉系幹細胞動員因子を用いた間葉系幹細胞動員の確認1)で同定した因子をシリコンチューブ内に充填し、green fluorescent protein (GFP)トランスジェニックマウス由来骨髄を移植したGFP-BMTマウスの皮下に移植した。2週間後に移植チューブを取り出し、チューブ内に集積した細胞を培養した結果、骨及び脂肪分化能、さらには表皮細胞への分化能を持った間葉系幹細胞の存在が明らかになった。

1）在皮肤提取物中搜索骨髓间充质干细胞募集因子，我们发现在小鼠皮肤再生的皮肤再生机制中，骨髓衍生的表皮细胞和成纤维细胞中有许多骨髓衍生的表皮细胞和成纤维细胞，我们对骨髓摩row虫的骨髓干细胞募集因子的可能性进行了研究，从而释放出骨髓骨髓的骨髓菌株。具体而言，使用Boyden腔室法测量了皮肤提取物中的间质干细胞募集活性。结果，据揭示了皮肤提取物中存在极强的骨髓间充质细胞动员活性。接下来，使用这种骨髓间充质干细胞募集活性作为指数，通过柱色谱法进行了招募因子的搜索。 SDS电泳在馏分中包含的蛋白质具有最高的募集活性，并通过质谱法进行了候选动员因子的鉴定，从而导致三种候选蛋白质。对于这些候选蛋白，我们使用Boyden室搜索了间充质干细胞募集活性，最后发现一种蛋白质具有骨髓间充质干细胞募集活性。 2）使用骨髓间充质干细胞募集因子确认间充质干细胞募集1）将其填充到硅管中，并皮下植入了用绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠衍生的骨髓的GFP-BMT小鼠。两周后，除去植入管，并培养了在管中积累的细胞，结果，揭示了具有分化骨骼和脂肪的能力以及分化为表皮细胞的间充质干细胞的存在。

项目成果

Basal keratinocyte-targeting gene delivery system for in vivo EB gene therapy

用于体内 EB 基因治疗的基础角质形成细胞靶向基因递送系统

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimbo T;Kawachi M;Saga K;Fujita H;Yamazaki T;Tamai K;Kaneda Y;Katsuto Tamai
• 通讯作者: Katsuto Tamai

Bone marrow-derived keratinocytes can ameliorate abnormality of the genetic skin disease

骨髓来源的角质形成细胞可以改善遗传性皮肤病的异常

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimbo T;Kawachi M;Saga K;Fujita H;Yamazaki T;Tamai K;Kaneda Y;Katsuto Tamai;Katsuto Tamai;Katsuto Tamai
• 通讯作者: Katsuto Tamai

Rapid transport of plasmid DNA into the nucleolus via actin depolymerization using HVJ envelope vector

使用 HVJ 包膜载体通过肌动蛋白解聚将质粒 DNA 快速转运至核仁

• 发表时间: 2007
• 期刊: J Gene Med 9(1)
• 作者: Suvanasuthi S;Tamai K and Kaneda Y
• 通讯作者: Tamai K and Kaneda Y

Bone marrow is an essential source of keratinocytes in the grafted skin

骨髓是移植皮肤角质形成细胞的重要来源

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimbo T;Kawachi M;Saga K;Fujita H;Yamazaki T;Tamai K;Kaneda Y;Katsuto Tamai;Katsuto Tamai;Katsuto Tamai;Katsuto Tamai
• 通讯作者: Katsuto Tamai

Bone marrow stem cell therapy for epidermolysis bullosa

骨髓干细胞治疗大疱性表皮松解症

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimbo T;Kawachi M;Saga K;Fujita H;Yamazaki T;Tamai K;Kaneda Y;Katsuto Tamai;Katsuto Tamai
• 通讯作者: Katsuto Tamai