難溶性薬物のキャリアを目指した新規大環状ヘリックス蛋白質の創出

创建一种新型大环螺旋蛋白，用作难溶性药物的载体

基本信息

批准号：
13877380
负责人：
二木史朗
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

薬物の溶解性は新薬開発時における大きな問題の一つであり、溶解性が悪いために開発が断念される薬物は多々ある。この問題の解決のためにシクロデキストリンや、リポソーム、合成高分子など、様々な材料がキャリアとして用いられてきているが、目的物の包接、標的部位での薬物の放出、キャリア自体の毒性や安定性など、解決すべき問題点は多い。本研究では人工的にデザインした4本ヘリックスタンパク質を新しいタイプの薬物キャリアとして用いることの可能性について検討を行った。タンパク質の構築はヘリックス構造をとるようにデザインしたアミノ酸20残基程度のペプチドを固相合成し、これらを、チオエーテルあるいはジスルフィドのリンカーで架橋することにより行った。この手法により、アミノ酸90個程度からなる大環状ヘリックスタンパク質(分子量約1万)が得られることが分かった。これらのタンパク質と細胞膜との相互作用様式を調べるための予備的検討として、ヘリックスペプチドのリポソーム存在下と非存在下とのCDスペクトルを比較したが、大きな差異は認められず、膜存在下で期待したような大きな構造変化が起こるかどうかは疑問であることが示唆された。また、これらのタンパク質は熱、あるいは、変性剤存在下でも一般のタンパク質に比べて極めて安定であることがわかり、これは、リンカーの設計により、タンパク質自体が非常に固い構造をとっていることが窺われた。薬物包接においては、上記の目的に応じて、膜存在下に構造変化が誘起されるような、柔軟な構造を持つタンパク質が望ましいと考えられ、今後、ヘリックスペプチドの配列ならびにリンカーの構造についての再検討を行う予定である。

药物的溶解度是新药开发过程中的主要问题之一，由于溶解度差而被放弃了许多药物。各种材料（例如环糊精，脂质体和合成聚合物）已被用作解决此问题的载体，但是物体的覆盖范围，在目标部分中释放药物，载体本身的毒性要解决的问题，例如稳定性。在这项研究中，我们检查了将人工设计的四种螺旋键键作为一种新型的药物载体的可能性。蛋白质的构造是通过约20种氨基酸固化的肽来巩固的，这些氨基酸旨在采用螺旋结构，这些氨基酸被Chio Ether或Zithlfide桥桥接。该方法发现，获得了大约90个氨基酸组成的大环形螺旋戳（约10,000个分子量）。作为研究这些蛋白质和细胞膜之间相互作用样式的初步研究，我们比较了螺旋肽脂质体存在与不存在的脂质体之间的CD光谱有人提出，是否会发生重大的结构变化。事实证明，这些蛋白质与普通蛋白质在某个程度的存在中非常稳定，即使在存在变质的情况下，由于连接器的设计，这些蛋白质可能具有非常硬的结构。在药物覆盖范围内，人们认为，根据上述目的，需要具有柔性结构的蛋白质，例如膜的存在的结构变化，而螺旋规范的序列以及将来接头的结构。我们计划重新考虑。