細胞内抗原を標的としたin vivo抗体送達のための分子設計

针对细胞内抗原的体内抗体递送的分子设计

• 批准号: 21H04794
• 负责人: 二木 史朗
• 金额: $ 27.21万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-05 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H04794/
• 关键词: 抗体; 一本鎖抗体; 細胞内送達

本研究は、送達ペプチドを用いたin vivoレベルでの抗体(IgG)ならびに一本鎖抗体(scFv)の細胞内(サイトゾル)送達を可能とする指針を得ることを目的としている。in vivoにおける送達では、物性の違いにより体内挙動が異なるペプチドとIgG、scFvを同時に標的細胞に送達することが必要であり、これを可能とする効果的な複合体形成法を樹立する方法論の樹立を目指し検討を進めた。昨年度に見出した細胞内抗体送達ペプチドL17Eの3量体FcB(L17E)3とAlexa Fluor 488標識IgG [IgG(AF488)]との間のコアセルベート形成を介した高効率細胞内IgG導入に関連して、FcB(L17E)3の代わりにプルランとL17Eとの架橋体を用いてもIgG(AF488)と混合することでコアセルベートが形成され、IgG(AF488)の細胞内移行が見られることが確認され、コアセルベートを用いた様々な導入系の開発の可能性が示唆された。一方では脂質ナノ粒子（LNP）へのIgGの内封法を見出し、調製したLNPにより効果的なIgGの細胞内送達が見られることも示された。

本研究旨在获得使用递送肽在体内水平进行抗体 (IgG) 和单链抗体 (scFv) 细胞内（胞质）递送的指南。对于体内递送，有必要将由于其物理特性而在体内表现不同的肽、IgG和scFv同时递送至靶细胞，从而建立有效的复合物形成方法，从而使这成为可能。我们继续进行研究，目的是去年发现的细胞内抗体递送肽 L17E 的三聚体 FcB(L17E)3 和 Alexa Fluor 488 标记的 IgG关于通过[IgG(AF488)]之间的凝聚层形成而将IgG高效地导入细胞内，使用普鲁兰多糖和L17E的交联物代替FcB(L17E)3，结果确认了IgG(AF488)和凝聚层通过混合形成，并且 IgG (AF488) 被转移到细胞中，这表明使用凝聚层开发各种递送系统的可能性。另一方面，我们发现了一种将 IgG 封装在脂质纳米颗粒（LNP）中的方法，并证明制备的 LNP 可以有效地将 IgG 递送到细胞中。

项目成果

細胞膜の脂質パッキングと細胞内送達

细胞膜脂质堆积和细胞内递送

• 发表时间: 2021
• 作者: 二木史朗

Attenuated Membrane-lytic Peptides for Intracellular Delivery

用于细胞内递送的减毒膜溶解肽

• 发表时间: 2022
• 作者: Furumura Sho;Ozaki Taro;Sugawara Akihiro;Morishita Yohei;Tsukada Kento;Ikuta Tatsuya;Inoue Asuka;Asai Teigo;Shiroh Futaki
• 通讯作者: Shiroh Futaki

Attenuated Cationic Lytic Peptides for Intracellular Delivery

用于细胞内递送的减毒阳离子裂解肽

• 发表时间: 2023
• 作者: Takeda Ikuko;Yoshihara Kohei;Cheung Dennis L.;Kobayashi Tomoko;Agetsuma Masakazu;Tsuda Makoto;Eto Kei;Koizumi Schuichi;Wake Hiroaki;Moorhouse Andrew J.;Nabekura Junichi;狩野 方伸;Shiroh Futaki
• 通讯作者: Shiroh Futaki

L17ER4: A cell-permeable attenuated cationic amphiphilic lytic peptide

L17ER4：细胞渗透性减毒阳离子两亲裂解肽

• DOI: 10.1016/j.bmc.2022.116728
• 发表时间: 2022
• 期刊: Bioorganic & Medicinal Chemistry
• 作者: Shinga Kenta;Iwata Takahiro;Murata Kazuya;Daitoku Yoko;Michibata Junya;Arafiles Jan Vincent V.;Sakamoto Kentarou;Akishiba Misao;Takatani-Nakase Tomoka;Mizuno Seiya;Sugiyama Fumihiro;Imanishi Miki;Futaki Shiroh
• 通讯作者: Futaki Shiroh

抗体を液滴に濃縮し細胞内へ高速輸送

将抗体浓缩成液滴并将其快速输送到细胞中