多機能化一本鎖抗体によるアミロイドβ凝集体細胞内スワイプ療法の開発

使用多功能单链抗体开发β淀粉样蛋白聚集体细胞内擦拭疗法

• 批准号: 22K18380
• 负责人: 星 美奈子
• 金额: $ 16.64万
• 依托单位: Foundation for Biomedical Research and Innovation at Kobe
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K18380/
• 关键词: 神経変性疾患; 神経細胞死; 異常凝集体; アルツハイマー病; 治療法

アルツハイマー病は、アミロイドβ（Aβ）由来毒性凝集体が発症トリガーとなる。生理的に産生される未凝集Aβには神経保護作用があることが最近解ったが、毒性凝集体の形成過程は不明で、Aβを除去せず凝集体を選択的かつ早期に除去する方法はなかった。星らは、Aβは全神経で産生されるが、AD発症に直結すると考えられる毒性Aβ凝集体「アミロスフェロイド（ASPD）」は興奮性神経細胞でのみ形成されること、Aβがある細胞内小器官に運搬される細胞ではASPDが形成されないことを見出し（星：未発表）、毒性凝集体の選択的除去が重要かつ可能であるとの認識を得た。そこで、抗ASPDヒト化抗体を蛍光標識しASPDナノセンサーとすることで細胞内ASPD形成過程を解明する。次に、同抗体を改変し、ASPDを神経内で捕捉し細胞内自己消化、スワイプするという本共同研究を立案した。この創薬戦略を書いたレビューは、高い評価を得て、British J Pharma 2021年2月号の表紙として採択されるに至った。本提案は全く新しい試みであり、挑戦的研究として実施する意義は大きい。目的達成のために、初年度は、（1）ASPD抗体を蛍光標識化し、蛍光ナノセンサーとすることでASPD形成部位を同定する（2）細胞内でASPDを補足し除去出来るスワイプ抗体を設計作製する（3）上記抗体の性能を上げるために、ASPDとASPD抗体の相互作用についてNMRやX線結晶構造解析を用いることで原子レベルでの解明を目指すことを実施した。その結果、神経芽細胞腫において、ASPDを補足することが出来るものを作製することに成功した。現在、初代培養神経細胞を用いてその効果を検証中である。上記のとおり、予定した実験計画を順調に進めることが出来た。

在阿尔茨海默氏病中，触发从淀粉样β（Aβ）衍生的有毒骨料。尽管最近发现生理产生的未聚集的Aβ具有神经保护特性，但毒性聚集体的形成过程尚不清楚，并且没有方法可以选择性地和早期去除聚集体而无需去除Aβ。恒星和其他人发现Aβ是在整个神经中产生的，但是毒性Aβ聚集了“氨基磷类（ASPD）”，被认为直接与AD联系在一起，只能形成兴奋性神经元，而ASPD在转运到胞内细胞器（未公开）中的细胞中并没有形成，这些细胞不公开（未公开），并且可能会识别出毒性和可能的​​变态性，并且可能会被定毒。因此，通过荧光标记抗ASPD人源化抗体形成ASPD纳米传感器，细胞内ASPD形成的过程得到了阐明。接下来，我们提出了这项合作研究，其中对抗体进行了修改以在神经中捕获ASPD，细胞内自动分解和滑动。撰写该药物发现​​策略的评论受到了高度赞扬，并被作为2021年2月的《英国J Pharma》的封面。该提案是一项全新的事业，并且将其作为一项具有挑战性的研究具有重要意义。为了实现目标，在第一年，我们（1）通过荧光标记ASPD抗体并使用荧光纳米传感器（2）设计和创建可以补充细胞（3）中的ASPD来确定ASPD的抗体，以改善上述抗体的性能，我们可以在ASP上进行AS级互动，从而确定ASPD抗体（2）设计和创建可以补充细胞（3）中的Asp.在AS级互动的情况下，我们可以确定ASPD形成的位点。 NMR和X射线晶体结构分析。结果，我们成功地产生了可以补充ASPD的神经母细胞瘤。目前，正在测试原发性培养的神经元的作用。如上所述，我们能够通过计划的实验计划顺利进行。

项目成果

神経変性疾患研究部の研究内容

神经退行性疾病研究部的研究内容

High-throughput screening for agonists of ROS production in live human vascular endothelial cells.

• DOI: 10.1016/j.xpro.2021.101053
• 发表时间: 2022-03-18
• 期刊: STAR protocols
• 作者: Sasahara T;Hoshi M
• 通讯作者: Hoshi M

The damage of vascular cells by Alzheimer's amyloid-β assemblies, amylospheroids, increases the expression of BACE protein through endothelial cells-derived angiotensin II release.

阿尔茨海默氏症淀粉样蛋白-β 组装体（淀粉样蛋白球体）对血管细胞的损伤，通过内皮细胞衍生的血管紧张素 II 释放增加 BACE 蛋白的表达。

• 发表时间: 2022
• 作者: 笹原智也;星美奈子
• 通讯作者: 星美奈子