海洋無脊椎動物からの血管新生阻害剤の探索

从海洋无脊椎动物中寻找血管生成抑制剂

基本信息

批准号：
13218043
负责人：
中尾洋一
金额：
$ 2.69万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218043/
关键词：
血管新生海綿酵素阻害ホヤメタロポロテアーゼ

项目摘要

海洋無脊椎動物の抽出物、について管腔形成阻害および酵素阻害アッセイを行った。酵素は血管新生に深く関与するとされている膜型マトリックスメタロプロテアーゼ1(MT1-MMP)およびマトリックスメタロプロテアーゼ2(MMP2)を用い、阻害物質の選択性もあわせて検討した。その結果、三重県五ヶ所湾産の末同定ホヤおよび鹿児島県口之永良部島産の末同定海綿に強力かつ選択的なMMP2阻害活性が認められた。冷凍保存されていたホヤ検体800gを抽出後、MM2阻害活性を指標に溶媒分画、各種クロマトグラフィーを用いて阻害物質を単離した。阻害物質の構造は各種スペクトルデータからその平面構造を新規化合物である12-hydroxystearyl-1-sulfateと決定した。絶対立体化学は改良Mosher法および合成標品との比較より、鏡像異性体の混合物であることが明らかになった。新規MMP2阻害物質12-hydroxystearyl-1-sulfateはMMP2をIC_<50>値9.0μg/mLで阻害した。鹿児島産海綿を有機溶媒で抽出後、生物活性を指標に分画をすすめ、鮮やかな青色蛍光を示す物質を活性本体として5.0mg単離した。阻害物質の分子量は356と決定されたが、プロトンNMRにおいて低磁場領域に3つのシグナルを与えるのみで、スペクトル解析による構造決定は困難であった。現在化学構造を検討中である。

对海洋无脊椎动物提取物进行了管腔形成抑制和酶抑制测定。使用膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）和基质金属蛋白酶2（MMP2）使用酶，据说它们与血管生成深深涉及，还研究了抑制剂的选择性。结果，在Gokasho湾的亚识别汤匙，Mie县和来自Kagoshima县Kuchinonagarabu岛的亚鉴定的海绵中观察到了强和选择性的MMP2抑制活性。在提取了已储存冷冻的喷气样品的800 g之后，使用溶剂分级分离和使用MM2抑制活性作为指标分离抑制剂。抑制剂的结构由各种光谱数据确定为其平面结构，作为新型化合物12-羟基甲基-1-硫酸盐。与改进的Mosher方法和合成制剂相比，绝对立体化学是对映异构体的混合物。一种新型的MMP2抑制剂12-羟基甲基-1-硫酸盐抑制MMP2，IC_ <50>值为9.0μg/ml。用有机溶剂从kagoshima提取海绵后，使用生物学活性作为指示剂促进分馏，而表现出生动的蓝色荧光的物质为5.0 mg，将其分离为活性体。确定抑制剂的分子量为356，但质子NMR在低野区域仅给出了三个信号，因此难以通过光谱分析来确定结构。该化学结构目前正在研究中。