グルクロン酸転移酵素多型による薬物副作用の予知法開発に関する研究

基于葡萄糖醛酸转移酶多态性预测药物副作用方法的研究

基本信息

批准号：
13204041
负责人：
佐藤浩
金额：
$ 2.56万
依托单位：
Shiga University of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

肝細胞の小胞体に存在するUDP-グルクロン酸転移酵素は、薬物代謝の第2相に関与する主要な酵素である。本酵素はビリルビンやフェノールを基質とするグループと、主にステロイドを基質とする2群に大別されている。ビリルビンなどを基質とするグループは一つの遺伝子(UGT1)からスプライシングの違いにより、多数の基質特異性を異にする酵素タンパクを発現している。本研究はUGT1遺伝子から発現される酵素群の多型と、その多型が薬剤の副作用に及ぼす影響について、PCRによる塩基配列決定と培養細胞を用いた遺伝子発現系で検討し、同時に薬剤性肝障害患者の遺伝子解析を行い、得られた結果にもとづき、臨床応用できる副作用の予知法を確立することを目的として行った。その結果、以下の3点について明らかにした。1.UGT1由来の酵素について多型をしらべ、変異が酵素活性に与える影響にUGT1A1、UGT1A3については検討を終了した。UGT1A6,UGT1A10については多型の解析とその日本人での頻度の検討を終了し、現在多型により酵素活性がどの程度低下するかを培養細胞で発現ベクターを用いて検討中である。2.薬剤性肝障害を一定の頻度でおこす薬が、どのタイプの酵素で代謝されるのか、また遺伝的に代謝活性が低い場合に肝障害が起きるかどうかについても検討した。重篤な肝障害を起こす前立腺癌治療薬フルタミドの主代謝物2-アミノ-5-ニトロ-4-トリフルオロメチルフェノールがUGT1A1とUGT1A6で代謝されること、日本人に固有で比較的高頻度でみとめられるUGT1の変異(Y486D)が酵素活性を10%以下に低下させ、副作用発現に関与する可能性がわかった。3.DNAチップをもちてUGT1に比較的高頻度にみられる日本人に固有な変異が迅速に検出できることが確認された。

UDP-葡萄糖醛酸转移酶位于肝细胞内质网，是参与药物代谢第二阶段的主要酶。这种酶大致分为两组：一组的底物是胆红素和苯酚，另一组的底物主要是类固醇。由于剪接的差异，使用胆红素作为底物的一组从一个基因（UGT1）表达许多具有不同底物特异性的酶蛋白。在本研究中，我们利用PCR碱基测序和使用培养细胞的基因表达系统研究了UGT1基因表达的酶组的多态性及其对药物副作用的影响。本研究的目的是对患有该病的患者进行遗传分析。疾病，并根据所获得的结果，建立一种可应用于临床的预测副作用的方法。结果明确了以下三点。 1.我们研究了UGT1衍生酶的多态性，并完成了突变对UGT1A1和UGT1A3酶活性影响的研究。关于UGT1A6和UGT1A10，我们已经完成了日本人中的多态性分析和频率检查，目前正在研究使用培养细胞中的表达载体的多态性使酶活性降低了多少。 2.我们还调查了哪些类型的酶以一定的频率代谢引起药物性肝损伤的药物，以及肝损伤是否发生在遗传性低代谢活性的患者中。 2-氨基-5-硝基-4-三氟甲基苯酚是前列腺癌治疗药物氟他胺的主要代谢物，会造成严重的肝损伤，由UGT1A1和UGT1A6代谢，是日本人特有的，并且被发现相对频繁。观察到的 UGT1 突变 (Y486D) 将酶活性降低至不到 10%，这表明它可能参与了副作用的发生。 3. 已证实，日本人特有的突变（UGT1 中相对常见）可以使用 DNA 芯片快速检测。