飼育室(装置)排気系ダストによる実験動物病原体ゲノムの新リアルタイム検出法の開発

利用动物排气系统粉尘开发实验室动物病原体基因组实时检测新方法

基本信息

批准号：
17650120
负责人：
佐藤浩
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17650120/
关键词：
ダスト排気エアロゾル PCR ゲノム実験動物飼育室

项目摘要

1.パラインフルエンザウイルス1〜4型のウイルスゲノム診断における特典性の検討前年度は主として検出感度を吟味した結果、求める高感度が得られたので、本年度は特異性の面について検討を行うこととした。パラインフルエンザウイルスには1〜4型のウイルスが存在し、そのうち、1型及び3型にはヒト型および動物型が存在する。ゲノム診断には、1型及び3型を鑑別できる特異性が求められる。実験動物における自然感染において、パラインフルエンザウイルス感染パターンは、1)センダイウイルス単独感染2)ヒトパラインフルエンザウイルス3型ウイルス単独感染3)両者の混合感染が想定される。したがって、これらの感染パターンを鑑別できるか否かを検討する必要があり、そのため、RT-nested PCR法を用いた。検討の結果、特異性があり、実用に十分耐えうる結果が得られた。本法は迅速診断が可能であり、間接蛍光抗体法、ELISA法による確認検査と相侯って、実験動物におけるパラインフルエンザウイルス感染の有効な診断法が樹立できたものと考える。2.ダスト捕集法の改良高感度で特異性のある本ゲノム診断法の実用性を高めるために、実験動物飼育室(装置)中の空中飛散ダストを効率良くかつ簡単に捕集できる方法と素材が必要である。前年度、通常のペーパー製フィルターと東レ製のナイロン素材であるトレミクロン^【O!R】(プリフィルター)を比較実験したところ、1回目の結果では良好なダスト捕集能を示すデータが得られたので、さらに再現性を高める捕集方法の開発について簡便にダストを捕集できる素材の検討を開始しつつあるが、まだ有意差は得られていない。

1. 检查副流感病毒 1 至 4 型病毒基因组诊断的好处去年，我们主要检查了检测灵敏度，结果达到了我们想要的高灵敏度，所以今年我们决定检查特异性方面做到了。副流感病毒有1～4型，其中1型和3型包括人和动物型。基因组诊断需要特异性来区分 1 型和 3 型。在实验动物自然感染的情况下，副流感病毒感染模式被认为是1）单独感染仙台病毒，2）单独感染人副流感病毒3型病毒，以及3）两者混合感染。因此，有必要检查是否可以区分这些感染模式，因此我们使用了RT-巢式PCR方法。研究的结果是，我们获得了具体且足够耐用的实际结果。该方法能够实现快速诊断，并结合间接荧光抗体法和ELISA法的确认试验，我们相信我们已经建立了诊断实验动物副流感病毒感染的有效方法。 2. 集尘方法的改进为了提高这种高灵敏度和特异性的基因组诊断方法的实用性，我们开发了一种能够高效、轻松地收集实验动物饲养室（设备）空气中灰尘的材料。去年，我们对普通纸质过滤器和东丽制造的尼龙材料 Toray Micron^[O!R]（预过滤器）进行了比较实验，第一个结果显示数据显示出良好的集尘性能。我们开始考虑容易收集灰尘的材料，以开发一种可进一步提高再现性的收集方法，但我们尚未发现显着差异。