多項目同時測定用杯スループット電気化学発光型免疫センサーアレイ

用于同时测量多个项目的吞吐量电化学发光免疫传感器阵列

基本信息

批准号：
00F00138
负责人：
民谷栄一
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Japan Advanced Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

DNA、抗体、酵素などの多種類の生体分子の同時計測は、生物情報を理解する上できわめて重要となっている。最近特に、DNAチップに代表されるように一つのチップ上に集積化したデバイスが注目を集めている。すでにDNAチップアレイの作製方法としてはリソグラフ法とスタンプ法等が知られている。ここでは、新規な工程を目指して、無作為液中自己組織化法(random fluidic self-assembly method、RFSA法)を提案している。まず、洗浄したカバーガラスの片面にスピンコーターにより疎水性のCPFP(cyclizedperfluoropolymer)を厚さ0.5mmでコーティングした。次いで、反対面にクロム/金を蒸着した。そして、ダイシングマシンで100〜400・m角程度の大きさに切って微小担体を作製した。この上にチオール誘導体およびアビジンを介して5｀末端にビオチン修飾DNAを固定化した。また、相補的DNAは5｀末端にFITCを修飾して用いた。一方、スライドガラスの片面にCPFPをコーティングした後、クロム/金を蒸着した。次いで、ネガの厚膜用レジストをコーティングした。リソグラフ工程および酸素プラズマ処理することにより親水性・疎水性に分けて100〜500・m角の10000〜400個/cm2と四方に厚さ30〜50・m角の壁が設けられた安定性を持つチップパターンを作製した。エタノール90%溶液を入れたシャーレにチップパターンを載せた。ここに各種のDNAが固定された8000個ほどの担体群を入れると、重力および疎水性相互作用によりチップパターンに担体群が沈降してランダムに各々の疎水性サイトに配置された。リソグラフ工程および酸素プラズマ処理により設けられたチップパターンの親水性・疎水性部分は各々100・m角で、10000個/cm2と四方に高さ30〜50・mの壁が規則正しく設けられて担体(DNAチップ)の固定後にも安定性が期待される。壁の親水性部分の側面の観察から親水性部分と壁とのエッチングがうまく出来ていることが示された。さらに、配置させる担体には各々異なるドットパターンをリソグラフィーであらかじめマーキングしておくことも出きるため、ランダム配置後の同定も可能である。

在理解生物学信息方面，对各种生物分子（例如DNA，抗体和酶）进行了相同的时钟测量非常重要。最近，已经集成在一个芯片上的设备，尤其是由DNA芯片代表的设备引起了人们的注意。生产DNA芯片阵列的方法已经以光刻法和邮票方法而闻名。在这里，我们建议用于新过程的随机流体自组装方法RFSA方法。首先，在洗涤后的盖玻璃的一侧覆盖了水电CPFP（环化氟聚合物），厚度为0.5 mm。然后，将铬/黄金沉积在另一侧。然后，通过切成约100至400 m号角的见于机器来创建一个小载体。通过TIOR衍生物和抗生物素固定在5｀的末尾，将生物素修饰的DNA固定在5｀的末尾。通过在5｀的末尾修改FITC来使用互补的DNA。另一方面，将CPFP涂在滑动玻璃的一侧后，将铬/金蒸。接下来，将负厚的膜重新涂覆。通过执行裂料和氧血浆加工，将100-500至100,000至400块/CM2和M号角分为水文和疏水性处理。将芯片图案放在装有90％乙醇溶液的Charle上。当固定各种DNA时，固定了约8,000个载体，由于重力和疏水相互作用，尖端图案固定在尖端图案上，并随机放置在每个疏水部位上。石版画提供的芯片图案和氧血浆加工为100/m喇叭，并且在固定稳定性后，定期在10,000块/cm2上定期提供30至50的墙壁。 DNA芯片）。壁的亲水性部分的观察表明，亲水部分和壁之间的蚀刻已经很好地制成。此外，可以在随机排列后识别，因为在分配的载体中的LIC摄影中可以标记具有光刻的不同点模式。