造血幹細胞分化における不均等分裂の解析

造血干细胞分化过程中不均等分裂的分析

基本信息

批准号：
11877170
负责人：
須田年生
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877170/
关键词：
不均等分化 Stochastic Model GATA-1転写因子 GFP 娘細胞

项目摘要

我々は、1984年に一個の造血前駆細胞に由来する一対の娘細胞が同一の培養条件下にも、赤血球と白血球あるいは多細胞系列と単細胞系列というような不均等分化をすることを示した。(Suda T,Suda J,Ogawa M:Proc Natl Acad Sci USA 81:2520-2524,1984)。これは、造血細胞の分化は、外からの増殖因子によって指令されるものではなく、細胞自体のプログラムによって進行する事象であるとするStochastic Modelの根拠となった。一個の細胞が2個に分裂したときに、細胞分化の方向が不均等に起きたことを直接証明しようとした。1)GATA-1転写因子が赤血球・巨核球に発現していて、白血球には発現しないことが明らかになったこと、2)Green Fluorescence Protein(GFP)の蛍光をCCDカメラで鋭敏に捉えられるようになったことより、一対の娘細胞において、GATA-1の発現の程度を検討し、赤血球・巨核球分化と白血球分化の不均等分化を追跡した。しかしながら、現時点では、半固形培地に存在する単細胞の蛍光強度を正確に測定することができず、娘細胞の一方にGATA-1が発現し、他方に発現しないという不均等分裂をとらえることはできなかった。また、赤血球・巨核球においてもGATA-1の発現は、一定で継続するものではないことが分かり、上記の方法論に問題が生じた。今後、造血細胞分裂におけるRNAあるいは蛋白の不均等分配は、共焦点レーザー顕微鏡の導入によってアプローチできると考える。

我们在1984年表明，一对源自单个造血祖细胞细胞的子细胞经历不等的分化，例如红细胞和白细胞或多细胞和单细胞系，即使在相同的培养条件下也是如此。（Suda T，Suda J，Ogawa M：Proc Natl Acad Sci USA 81：2520-2524，1984）。这是随机模型的基础，该模型指出，造血细胞的分化是通过细胞本身程序进行的事件，而不是由外部生长因子指导。我们直接试图证明，当单个细胞分为两个时，细胞分化的方向发生不均匀。 1）揭示了GATA-1转录因子在红细胞和巨核细胞中表达，而不是白细胞； 2）由于现在可以用CCD摄像头捕获绿色荧光蛋白（GFP）的荧光，因此在一对子细胞中检查了GATA-1表达的程度，以及红细胞和巨核细胞分化白细胞差异的不平等分化。但是，目前，无法准确测量存在半固体培养基中的单个细胞的荧光强度，并且不可能捕获在一个子细胞之一而不是在另一个子细胞上表达的GATA-1的不平坦分裂。此外，发现GATA-1表达不是恒定的，并且在红细胞和巨核细胞中持续持续，从而导致上述方法的问题。将来，可以通过引入共聚焦激光显微镜来接近造血细胞分裂中RNA或蛋白质的异质分布。