造血幹細胞の静止期維持におけるp57(Kip2)分子制御機構

p57（Kip2）维持造血干细胞稳定期的分子控制机制

基本信息

批准号：
08F08118
负责人：
須田年生
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08118/
关键词：
造血幹細胞 CDKインヒビター静止期維持

项目摘要

昨年度はp57による造血幹細胞静止状態維持の分子機構を詳細に検討するために、ノックアウトマウス胎生期の肝臓由来の造血幹細胞を用いて、放射線照射したマウスに移植するin vivo実験系で解析した。1)p57の欠損に従って、p27が造血幹細胞の細胞質における発現が特異的に増加することがわかった。その結果より、造血幹細胞のp57が欠損する場合、その静止期維持における機能はp27が代償する可能性が考えられる。2)静止期造血幹細胞のcyclin Dの転写活性は高いレベルを維持することを見出した。また、新規p57結合タンパクHsc70がcyclin Dタンパクの局在を制御することによって、造血幹細胞の細胞周期制御に重要な役割を果たしていることが示された。3)Hsc70のinhibitorデオキシスパガリン(DSG)を用いて実験では、DSGは造血幹細胞の静止期での維持を阻害することがわかった。この結果より、p57とhsc70、およびcyclinD三者の相互作用が造血幹細胞の細胞周期制御において重要な働きをしていると考えられる。4)CDK inhibitorであるp27もHsc70と結合し、Hsc70/cyclin D複合体を細胞質に安定化させることによって、幹細胞の静止期維持に働くことがわかった。p57とp27は単独に一つでも存在すると静止期維持の機能できるが、両者の発現がともに抑制される場合、Hsc70/cyclin D複合体が核内に排出され、幹細胞静止状態の維持ができなくなることが証明された。

去年，为了详细研究p57维持造血干细胞静止的分子机制，我们使用了来自基因敲除小鼠胚胎肝脏的造血干细胞，并使用体内实验系统对其进行了分析，在该系统中将它们移植到受辐射的环境中。老鼠。 1) 发现造血干细胞细胞质中 p27 的表达因 p57 缺乏而特异性增加。结果表明，当造血干细胞中p57缺乏时，p27可以补偿其维持稳定期的功能。 2）我们发现静息造血干细胞中cyclin D的转录活性仍保持在较高水平。此外，研究表明，新型p57结合蛋白Hsc70通过控制细胞周期蛋白D蛋白的定位，在造血干细胞的细胞周期控制中发挥重要作用。 3）使用Hsc70抑制剂脱氧斯帕加林（DSG）进行的实验表明，DSG抑制造血干细胞在静息期的维持。这些结果表明p57、hsc70和cyclinD之间的相互作用在造血干细胞的细胞周期控制中发挥重要作用。 4）发现CDK抑制剂p27也与Hsc70结合并稳定细胞质中的Hsc70/cyclin D复合物，从而维持干细胞的稳定期。当p57和p27单独存在时，它们可以起到维持静止期的作用，但是当两种表达都被抑制时，Hsc70/cyclin D复合物被分泌到细胞核中，使得干细胞无法维持静止状态，这一点已被证明。。