造血幹細胞と血管幹細胞における遺伝子発現の系統的解析

造血干细胞和成血管细胞基因表达的系统分析

基本信息

批准号：
14657247
负责人：
須田年生
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657247/
关键词：
造血幹細胞血管前駆細胞遺伝子発現 Side Population Main Population p21 細胞周期遺伝子 Sir2

项目摘要

本研究では、造血幹細胞と血管前駆細胞の遺伝子発現をDNA arrayを用いて、系統的に解析しその異同を明らかにすることを目的とした。ここでは、未分化細胞集団に限定し、しかもin vitro培養系において、高率に純化された細胞群を対照として用いる。今年度は以下のことを明らかにした。1)マウス骨髄幹細胞(c-Kit陽性Sca-1陽惟Lin陰性細胞:KSL細胞)は、蛍光色素排出率の高いSide Population (SP)と低いMain Population (MP)に分かれることが明らかとなった。SPは、胎仔肝や新生仔期骨髄には認められず、生後4週頃より検出できる。我々は、SP細胞の70-80%がTIE2陽性細胞であることを見いだした。骨髄組織の免疫染色により、幹細胞は骨芽細胞の近く、あるいは、それに接して存在することを明らかにした。さらに、アンジオポエチン-1は、TIE2受容体を介して、幹細胞がニッチと接着するのを誘導することを示した(Arai F, Hirao A et al, Cell, in revise)。2)マウスES細胞から、造血細胞と血管内皮細胞の分化誘導をはかり、遺伝子の発現を解析した。造血幹細胞には、TIE2, GATA-2, Evi-1, nanogなどの分子が発現していることを確認した(Hamaguchi I, et al, in preparation)。しかしながら、血管幹細胞特異的遺伝子を同定することはできなかった。

在本研究中，我们旨在利用DNA阵列系统分析造血干细胞和血管祖细胞的基因表达并阐明它们的差异。在这里，我们使用仅限于未分化细胞群且在体外培养系统中高度纯化的细胞群作为对照。今年，我们明确了以下内容： 1) 小鼠骨髓干细胞（c-Kit 阳性 Sca-1 Yangyoshi Lin 阴性细胞：KSL 细胞）被分为荧光染料排泄率高的侧群 (SP) 和荧光染料排泄率低的主群 (MP)排泄率。 SP 在胎儿肝脏或新生儿骨髓中未发现，但在出生后 4 周左右即可检测到。我们发现70-80%的SP细胞是TIE2阳性细胞。骨髓组织的免疫染色显示干细胞存在于成骨细胞附近或与其接触。此外，血管生成素-1 被证明可以通过 TIE2 受体诱导干细胞粘附到微环境（Arai F、Hirao A 等人，Cell，修订中）。 2）我们诱导小鼠ES细胞分化为造血细胞和血管内皮细胞，并分析基因表达。我们证实了诸如TIE2、GATA-2、Evi-1和nanog等分子在造血干细胞中表达（Hamaguchi I等人，正在准备中）。然而，没有鉴定出成血管细胞特异性基因。