リンパ系組織で構成的に発現するケモカイン群のHIV持続感染における役割の解明

阐明淋巴组织中组成型表达的趋化因子在持续性 HIV 感染中的作用

基本信息

批准号：
11161233
负责人：
義江修
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kinki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11161233/
关键词：
HIV ケモカイン SLC ELC CCR7 CXCR4 CCR5 ATL

项目摘要

本研究はリンパ節などの2次リンパ組織で構成的に発現しているケモカイン群のHIV感染における役割を多面的に明らかにすることを目的とする。本年度の成果は以下の通りである。(1)SLCとELCはCCR7に作用してナイーブリンパ球や成熟樹状細胞の2次リンパ組織へのホーミングに重要な役割をはたすCCケモカインである。我々はSLCとELCがR5およびX4のいずれのタイプのHIV-1株に対しても活性化PBMでの増殖を促進することを見い出した。この効果の少なくとも一部はウイルスLTRからの転写促進に由来する。2次リンパ組織で構成的に発現するSLCやELCは2次リンパ組織でのHIV持続感染を促進する可能性が示された。(2)HIV-2ではコレセプター特異性を決定する領域はまだ詳細に調べられていない。そこで、X4タイプのROD株と我々が新たにR5タイプであることを明らかにしたGH-1株の間でキメラウイルスを作製し、CXCR4とCCR5に対する特異性を解析した。その結果、HIV-2でもエンブロープ蛋白のV3領域がコレセプター特異性で主要な役割をになうことを明らかにした。(3)CCR7のN末端細胞外領域に由来するペプチド(17アミノ酸)でマウスを免疫し、単クローン抗体を作製した。この抗体はヒトのCCR1〜7のトランスファクタントを用いたFACS解析から、CCR7特異的であった。ただしウエスタンブロットでは他の細胞蛋白質とも交差反応を示し、また中和活性もまかった。そこで、まずATL細胞でのCCR7の発現を解析した。その結果、正常人末梢血リンパ球と比較してATL細胞ではCCR7の発現が亢進しており、特に臓器浸潤を示す症例でCCR7の発現がさらに強かった。T細胞の2次リンパ組織へのホーミングに働くCCR7がATL細胞の臓器浸潤にも重要な役割をはたしている可能性が示された。

本研究的目的是阐明在二级淋巴组织（例如淋巴结）中组成型表达的趋化因子在 HIV 感染中的多方面作用。今年的结果如下。 (1) SLC和ELC是作用于CCR7的CC趋化因子，在幼稚淋巴细胞和成熟树突状细胞归巢至次级淋巴组织中发挥重要作用。我们发现，SLC 和 ELC 促进 R5 和 X4 型 HIV-1 毒株的活化 PBM 生长。这种效应至少部分源自病毒 LTR 的转录增强。研究表明，在次级淋巴组织中组成型表达的SLC和ELC可能促进次级淋巴组织中的持续HIV感染。 (2)在HIV-2中，决定辅助受体特异性的区域尚未得到详细研究。因此，我们创建了X4型ROD毒株和GH-1毒株之间的嵌合病毒，我们将其新鉴定为R5型，并分析了其对CXCR4和CCR5的特异性。结果表明，包膜蛋白的 V3 区在 HIV-2 的辅助受体特异性中也发挥着重要作用。 (3)用CCR7 N末端胞外区衍生的肽(17个氨基酸)免疫小鼠以产生单克隆抗体。基于使用人 CCR1-7 转染子的 FACS 分析，发现该抗体具有 CCR7 特异性。然而，蛋白质印迹显示与其他细胞蛋白的交叉反应，并且还观察到中和活性。因此，我们首先分析ATL细胞中CCR7的表达。结果，与正常人外周血淋巴细胞相比，ATL细胞中CCR7的表达增加，并且在表现出器官侵袭的病例中CCR7的表达特别强。研究表明，CCR7在T细胞归巢至次级淋巴组织中发挥作用，也可能在ATL细胞的器官浸润中发挥重要作用。