樹状細胞とケモカインを用いた遺伝子療法の基礎的研究

利用树突状细胞和趋化因子进行基因治疗的基础研究

• 批准号: 13770680
• 负责人: 清水 公一
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770680/
• 关键词: ケモカイン; 遺伝子治療; 樹状細胞; 癌ワクチン; 免疫細胞療法; SLC; 免疫療法

SLC遺伝子をコードしたアデノウイルスベクターを作製した。樹状細胞に遺伝子導入をおこない、導入効率の良い条件を設定した。まずマウスの悪性黒色腫モデルを用いて、皮下腫瘍に対して自己腫瘍抽出抗原をパルスした樹状細胞で治療を行った。対照群と比較して腫瘍増殖は抑制され、生存期間は4倍以上延長した。次にアデノウイルスでSLCを遺伝子導入された樹状細胞ワクチンと遺伝子導入されていない樹状細胞ワクチンで有効性に差がでるかを検討した。皮下腫瘍に対して、SLCを遺伝子導入された、自己腫瘍抽出抗原をパルスされた樹状細胞で治療を行うと遺伝子導入されていない樹状細胞ワクチンより腫瘍増殖は抑制され、生存期間は1.4倍ほど延長した。無治療群よりは約6倍生存期間が延長した。また皮下腫瘍を完全に拒絶したマウスが得られた(腫瘍拒絶マウス約30%)。次に治療モデルの実験で、SLCを遺伝子導入された樹状細胞を注射した皮膚と所属リンパ節を摘出し検討した。SLC遺伝子導入された樹状細胞を注入した皮膚では、樹状細胞とT細胞の集合塊が多数認められた。樹状細胞周囲にT細胞が遊走集積し抗原提示を受けることで樹状細胞ワクチン療法の治療効果が増強する可能性が得られた。

生成了编码SLC基因的腺病毒载体。将基因转移在树突状细胞中进行，并设置有效转导条件。首先，使用恶性黑色素瘤的小鼠模型来治疗用自体肿瘤提取抗原脉冲的树突状细胞的皮下肿瘤。与对照组相比，抑制肿瘤生长，生存率延长了四倍以上。接下来，我们研究了用腺病毒和尚未转染的树突状病毒和树突状细胞疫苗转染的树突状细胞疫苗之间的疗效差异。当用SLC转导的自体肿瘤提取的抗原用树突状细胞脉冲的抗原用树突状细胞治疗时，与未转染的树突状细胞疫苗相比，肿瘤生长被抑制，生存率延长了约1.4倍。生存期约为未经治疗组的六倍。此外，获得了完全拒绝皮下肿瘤（约30％的肿瘤释放小鼠）的小鼠。接下来，在治疗模型的实验中，除去了用SLC转化的树突状细胞注射的皮肤和区域淋巴结并检查。在注射SLC转导的树突状细胞的皮肤中，观察到许多树突状细胞和T细胞的簇。 T细胞可能在树突状细胞周围迁移并积聚，并接受抗原表现，从而增强了树突状细胞疫苗治疗的治疗作用。