細胞増殖を調節するカルシウム透過性チャネルの研究

调节细胞增殖的钙渗透通道的研究

基本信息

批准号：
10152206
负责人：
小島至
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞増殖にはカルシウムイオンの流入が増加することが必須で,これが抑制されると増殖因子はその増殖促進作用を発揮することが出来ない。細胞周期を進行させるプログレッション因子はカルシウム透過性チャネルを活性化して持続的なカルシウム流入増加を惹起するが,そのチャネルの分子実体はこれまでまったく明らかではなかった。本研究ではPCRを用いたクローニング法によりインスリン様成長因子(IGF-I)によって活性化されるカルシウム透過性チャネルの遺伝子クローニングを行いそのチャネルの調節機構について検討を行った。クローニングされたチャネルGRC(growth factor-regulated channel)は756個のアミノ酸からなる膜貫通蛋白で,疎水性の検討から6個の膜貫通部位を持つものと推定された。その一次構造はTRPに類似し,とくにVR-1とはアミノ酸レベルで40%の相同性を示した。GRCをCHO細胞に発現させるとカルシウム透過性チャネルとして機能した。生理的なカルシウムが存在する場合には,このチャネルは主にカルシウムなど二価陽イオンを透過した。GRCは非刺激時には細胞内プールに存在するが,IGF-Iにより細胞膜上にトランスローケーションした。IGF-Iを除去するとGRCチャネルは再びエンドサイトーシスにより細胞内プールにもどった。このようにGRCチャネルはその細胞内局在が変化することによって調節されるというまったく新しい調節機構をもっていた。

细胞增殖至关重要的是增加钙离子，如果抑制了钙离子，生长因子将无法发挥其生长促进作用。进行细胞周期的进展因素激活钙的可渗透通道并导致钙涌入的持续增加，但是直到现在，通道的分子实体尚不清楚。在这项研究中，通过使用PCR克隆来研究通道调节的机理，通过克隆进行了通过胰岛素样生长因子（IGF-I）激活的钙渗透通道的基因克隆。克隆的通道GRC（生长因子调节的通道）是由756个氨基酸组成的跨膜蛋白，据估计，它具有基于疏水性研究的六个跨膜位点。它的主要结构与TRP相似，并且在氨基酸水平上显示了40％同源性，尤其是在VR-1上。 GRC在CHO细胞中的表达用作钙渗透通道。在存在生理钙的情况下，该通道主要可渗透到二价阳离子（例如钙）。当不刺激时，GRC存在于细胞内池中，而是通过IGF-I转移到细胞膜上。去除IGF-I后，通过内吞作用再次将GRC通道再次返回到细胞内池。因此，GRC通道具有全新的调节机制，该机制受细胞亚定位的改变。