クロイツフェルト・ヤコブ病の発症因子と発症機序の解明

克雅氏病致病因素及发病机制的阐明

基本信息

批准号：
08671105
负责人：
玉井洋一
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

[実験目的]クロイツフェルト・ヤコブ病(CJD)をはじめとする伝達性海綿状脳症の脳の組織学的特徴である海綿状変性形成の機構を明らかにすることを目的として、異常ブリオンタンパク(PrP^<CD>)の蓄積、サイトカインTNF-αとIL-1α)のmRNAの発現、および誘導型の一酸化窒素合成酵素(iNOS)mRNAの発現状態を調べ、これらの相関関係について考察した。[実験結果]SWR/jマウス脳に北里1株を接種すると、接種後15週目から16週目に発病し、徐々に憎悪して21-22週で死亡する。この過程で、PrP^<CJ>の蓄積は接種後16週目にウエスタン・ブロットにより確認され、以後病気の進行とともに増量した。TNF-αとIL-1α-mRNAの発現はRT-PCR法により19週から22週目に観察された。グリオーシスの指標となるGFAP-mRNAの発現も経日的に増加し、19-22週で最大値に達した。iNOS-mRNAは7、13週目の試料でかすかなバンドが検出され、19、22週目で急激に発現が増強した。CJDマウス脳でNOSの過剰発現を観察したのは本実験が最初である。[結論]本実験の結果から海綿状変性について以下の機序が推測された。PrP^<CJ>の蓄積が引き金になってアストログリアあるいはマクロファージ/ミクログリアが活性化され、その結果サイトカインの産生が賊活されてNOSの合成を刺激し、過剰に産生されたNOにより、神経細胞死およびミエリンの空胞化が起る。今後、NOSタンパクの分析、神経細胞のアポトーシスの解析を進め、海綿状変性形成の機構を解明する予定である。

[Experimental Purpose] With the aim of clarifying the mechanism of sponge degeneration, which is a histological feature of the brain of transmissible spongiform encephalopathy, including Creutzfeldt-Jakob disease (CJD), we investigated the accumulation of abnormal brion protein (PrP^<CD>), expression of the mRNA of cytokines TNF-α and IL-1α, and the expression status of可诱导的一氧化氮合酶（iNOS）mRNA，并检查了它们的相关性。 [实验结果]当SWR/J小鼠的大脑被一种kitasato菌株接种时，它们在疫苗接种后的15到16周就发育于该疾病上，并逐渐憎恨并死亡21至22周。在此过程中，通过在接种后16周的蛋白质印迹证实了PRP^<cj>积累，随后随着疾病的发展而增加。 RT-PCR从19至22周观察到TNF-α和IL-1α-MRNA的表达。 GFAP-MRNA的表达是神经胶质病的指标，在一天的过程中也增加了，达到了19-22周的最大值。在第七周和第13周，在样品中检测到微弱的iNOS-mRNA带，在第19和22周，iNOS-MRNA的表达迅速增加。该实验是我们第一次观察到CJD小鼠大脑中的NOS过表达。 [结论]从该实验的结果中推断出海绵变性的以下机制。 PRP^<cj>的积累触发了星形胶质细胞或巨噬细胞/小胶质细胞的激活，从而导致细胞因子的产生以刺激NOS合成，并且没有产生过度引起神经元细胞死亡和髓磷脂吸尘。将来，我们计划分析NOS蛋白和神经元凋亡，以阐明海绵变性的机制。