クロイツフェルト・ヤコブ病の発症因子と発症機序の解明

克雅氏病致病因素及发病机制的阐明

基本信息

批准号：
08671105
负责人：
玉井洋一
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

[実験目的]クロイツフェルト・ヤコブ病(CJD)をはじめとする伝達性海綿状脳症の脳の組織学的特徴である海綿状変性形成の機構を明らかにすることを目的として、異常ブリオンタンパク(PrP^<CD>)の蓄積、サイトカインTNF-αとIL-1α)のmRNAの発現、および誘導型の一酸化窒素合成酵素(iNOS)mRNAの発現状態を調べ、これらの相関関係について考察した。[実験結果]SWR/jマウス脳に北里1株を接種すると、接種後15週目から16週目に発病し、徐々に憎悪して21-22週で死亡する。この過程で、PrP^<CJ>の蓄積は接種後16週目にウエスタン・ブロットにより確認され、以後病気の進行とともに増量した。TNF-αとIL-1α-mRNAの発現はRT-PCR法により19週から22週目に観察された。グリオーシスの指標となるGFAP-mRNAの発現も経日的に増加し、19-22週で最大値に達した。iNOS-mRNAは7、13週目の試料でかすかなバンドが検出され、19、22週目で急激に発現が増強した。CJDマウス脳でNOSの過剰発現を観察したのは本実験が最初である。[結論]本実験の結果から海綿状変性について以下の機序が推測された。PrP^<CJ>の蓄積が引き金になってアストログリアあるいはマクロファージ/ミクログリアが活性化され、その結果サイトカインの産生が賊活されてNOSの合成を刺激し、過剰に産生されたNOにより、神経細胞死およびミエリンの空胞化が起る。今後、NOSタンパクの分析、神経細胞のアポトーシスの解析を進め、海綿状変性形成の機構を解明する予定である。

[实验目的] 本研究的目的是阐明海绵状变性的机制，海绵状变性是包括克雅氏病（CJD）在内的传染性海绵状脑病的大脑组织学特征，我们研究了^<CD>）的积累，检测细胞因子TNF-α和IL-1α) mRNA的表达情况，以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA的表达状况，并讨论它们之间的相关性。 [实验结果]当将Kitasato 1株接种到SWR/j小鼠脑中时，接种后15至16周发病，逐渐恶化，并在21-22周时死亡。在此过程中，接种后16周通过蛋白质印迹证实了PrP^<CJ>的积累，并且此后随着疾病的进展其量增加。第19周至第22周通过RT-PCR观察TNF-α和IL-1α-mRNA的表达。胶质细胞增生指标 GFAP-mRNA 的表达也随着时间的推移而增加，并在 19-22 周时达到最大值。第 7 周和第 13 周时，在样本中检测到一条微弱的 iNOS-mRNA 条带，表达量在第 19 周和第 22 周时迅速增加。该实验首次观察到克雅氏病小鼠大脑中 NOS 的过度表达。 [结论] 根据本实验的结果，推断出以下海绵状变性的机制。 PrP^<CJ> 的积累触发星形胶质细胞或巨噬细胞/小胶质细胞的激活，进而损害细胞因子的产生并刺激 NOS 的合成，发生死亡和髓磷脂空泡化。未来，我们计划分析NOS蛋白和神经元凋亡，以阐明海绵状变性的机制。