神経系培養細胞の分化、機能発現の制御に関わるガングリオシドの役割

神经节苷脂在调节培养神经系统细胞分化和功能表达中的作用

基本信息

批准号：
03255215
负责人：
玉井洋一
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

PC12細胞はnerve growth factor(NGF)に応答してneuriteを形成し、ガングリオシド構成も変化する。我々は今までに特定のガングリオシド構成の変化は分化の方向に始動したprimed細胞の方が高く、またアセチルコリンエステラ-ゼ活性の変化と相関していることを見いだしている。本研究ではPC12細胞のNGFによる分化過程のガングリオシドの動態を検討するために、ガングリオシド合成シアル酸転酵素活性の変化を経時的に調べた。PC12をNGFで48時間処理して突起の出た細胞を分化細胞(5μm以上のneurite保持細胞、17%)とし、シアル酸転移酵素の反応産物は、TLCーラジオ-トグラフィ-で標準物質の移動度と比較して確認した。GD3合成酵素については特異的モノクロ-ナル抗体によるTLCー免疫染色で確認した。(1)分化PC12細胞のGD3合成酵素(CMPシアル酸:GM3ーα2→8シアル酸転移酵素)活性は未分化細胞の約2倍であった。primed細胞であるMR31細胞にNGFを48時間処理した場合(5μm以上のneurrite保持細胞、64.7%)では約3倍となった。(2)Lactosylceramideを基質とするGM3合成酵素(α2→3)、GM1を基質とするGDla合成酵素(α2→3)、GDlaを基質とするGTla合成酵素(α2→8)、GTlbを基質とするGQlb合成酵素(α2→8)の各シアル酸転移酸素活性について調べた。GM3合成酸素およびGDla合成酵素活性は分化により2.5ー3倍となったが、GTlaとGQlb合成酸素活性は分化で変化しなかった。PC12細胞の分化に際し、ある特定のガングリオシド合成酵素が選択的に活性化されることが示唆された。(3)PC12細胞にはフコ-ス含有ガングリオシドが含まれるので、分化に伴うガングリオシド合成のフコ-ス転移酸素活性の変化と、分化及び増殖に関係のある癌遺伝子の発現について検討を行なっている。

PC12细胞响应神经生长因子（NGF）而形成神经，而神经节组成也会改变。我们先前已经发现，在分化方向引发的引发细胞中特定的神经节苷脂组成的变化较高，并且与乙酰胆碱酯酶活性的变化相关。在这项研究中，我们调查了随着时间的流逝，神经节苷脂合成唾液酸转化酶活性的变化，以研究NGF诱导的PC12细胞分化过程中神经毒剂的动力学。将PC12用NGF处理48小时，形成突出的细胞（5μM或更多的神经突的细胞，17％），与标准物质的迁移率相比，通过TLC-radotosemhings证实了乙烯基转移酶的反应产物。通过特异性单克隆抗体的TLC免疫染色证实了GD3合酶。（1）分化的PC12细胞中GD3合酶（CMP唾液酸：GM3-α2→8唾液酸转移酶）的活性约为未分化细胞的两倍。当启动细胞MR31细胞用NGF处理48小时（5μM或更多的Neurrite细胞，64.7％）时，结果大约高三倍。 (2) We investigated the sialic acid transsorption oxygen activities of GM3 synthase (α2→3), GM1-based GDla synthase (α2→3), GDla synthase (α2→8), GDla synthase (α2→8), and GQlb synthase (α2→8), GTlb-based GTlb-based GQlb合酶（α2→8）。由于分化，GM3合成氧和GDLA合酶活性高2.5-3倍，但是GTLA和GQLB合成氧的活性并未随着分化而改变。有人提出，在PC12细胞中，某些神经节苷脂合酶被选择性地激活。（3）由于PC12细胞含有含岩藻神经节的神经节剂，因此我们正在研究在分化与分化和增殖相关的致癌基因后，在神经节合成过程中，在神经节合成过程中，Fucos转移性氧活性的变化。