クロイツフェルト・ヤコブ病の発症因子と発症機序の解明

克雅氏病致病因素及发病机制的阐明

基本信息

批准号：
04670708
负责人：
玉井洋一
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至 1992
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究はクロイツフェルト・ヤコブ病(CJD)の発症因子および発症に伴って変化するマウス脳タンパク質を解明することが主目的である。予定した3つの実験計画の中の1課題と新たに計画した1課題に著しい成果が得られた。(1)CJD感染マウス脳タンパク質の二次元電気泳動解析(交付申請書記載):本年度は新たに非平衡PH匂配電気泳動(NEPHGE)法を取入れ、CJD感染能が濃縮されるミクロソーム画分のタンパク質を病症因子接種から発症に至る全過程で経時的に解析した。CJD北里1株接種後4,8,15,20,23週目に一個体ずつのマウス脳からミクロソームを調製した。非接種群も同様に処理した。タンパク質の電気泳動は一次元目を等電点電気泳動およびNEPHGE、二次元目をSDS-PAGEにより行った。分離したタンパク質スポットをコンピューターで計量化し、経時的に変動するスポットを解析した。その結果、塩基性タンパク質12種の動態を以下の3群に分類することができた。Type1:対照群(C)では経時的に一定であるが接種群(I)で増加が顕著で、かつ経時的変化を示す。Type2:CとIがほぼ平衡して経時的変化を示す。Type3:CとIの間に差が無く、経時的変化も無いもの。現在、発症との関連が示唆されるType1タンパク質についてアミノ酸配列などの解析、同定を遂行中である。(2)CJD罹患妊婦臓器における発症因子の分布(交付申請書提出後実験計画に追加):本症例は世界で2例目、自然発症例としては最初である。本患者の分娩時および剖検時に採取した試料をマウス脳に接種して、発症因子の分布を調べた結果、患者臓器のほかに母乳、斉帯血および胎盤にも感染性が検出された。妊婦試料を用いた接種実験は世界で最初である。本実験結果は母体内感染および授乳感染の可能性を示唆した(New Eng.J.Med発表)。本実験に関連して、雌マウスが感染により生殖能力を失うことを明らかにした(Arch.Virol発表)。

这项研究的主要目的是阐明发展Creutzfeldt-Jakob疾病（CJD）的因素以及随着疾病发作而变化的小鼠脑蛋白的变化。计划的三个计划实验计划之一和一项新计划的任务取得了重大成果。 (1) Two-dimensional electrophoresis analysis of CJD-infected mouse brain proteins (introduced in the grant application form): This year, a new non-equilibrium PH odorant electrophoresis (NEPHGE) method was adopted, and proteins in the microsomal fraction, which are concentrated infectious CJD, were analyzed over time over the entire process from inoculation of disease factors to onset.接种一cjd kitasato菌株后，在4、8、15、20和23周以4、8、15、20和23周中的小鼠大脑制备微粒体。无接种的组以相同的方式进行治疗。蛋白质的电泳是通过等电聚焦和Nephge在第一维中以及SDS-PAGE的第二维。使用计算机对分离的蛋白质斑点进行定量，以分析随着时间的流逝波动的斑点。结果，可以将12种基本蛋白质的动力学分类为以下三组：类型1：对照组（C）随着时间的推移是恒定的，但是在接收组（i）中，增加的增加是显着的，并且随着时间的推移显示了变化。类型2：C和我大致平衡并显示随时间变化。类型3：C和I之间没有区别，并且随着时间的流逝没有变化。目前，我们正在分析和识别1型蛋白质的氨基酸序列和其他信息，这被认为与发作有关。（2）CJD孕妇的因素发作的分布（提交发行申请后添加到实验计划中）：这是世界上第二和第一个自发的情况。在分娩时收集的样品和该患者的尸检被接种到小鼠大脑中，并检查了因子发作的分布，除了患者器官以及母乳，脐带血和胎盘外，还发现了传染性。这是世界上第一个使用孕妇样品的疫苗接种实验。该实验的结果表明可能会内部和母乳喂养感染（由New Eng.J.Med出版）。与该实验有关，我们透露，雌性小鼠因感染而失去生育能力（Arch。Virol出版）。