クロイツフェルト・ヤコブ病の発症因子と発症機序の解明

克雅氏病致病因素及发病机制的阐明

基本信息

批准号：
05670824
负责人：
玉井洋一
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究計画の中から、タンパク質の二次元電気泳動に関する実験を先に着手し、新たに我々が先に報告したクロイツフェルト・ヤコブ病(CJD)妊婦症例の知見を踏まえ、CJDの周産期感染のリスクを実験的に検討した。1:非平衡pHグラジエント電気泳動とSDS-PAGEとの組合せでマウス脳の12個のタンパク質スポットの経時的変動を解析した結果、正常群では一定であるが、感染群で顕著に増加する3個のスポットを特定することができた。現在アミノ酸配列を含めて構造解析中である。2:周産期および母体感染の可能性について〔実験1・母系、父系感染の検索〕感染♀マウスから生まれた仔マウスを実のCJD母マウスで哺育、正常母マウス(foster mother)で哺育、および正常マウスから生まれた仔マウスをCJD接種母マウス(foster mother)で哺育させる場合の3つのケースについて仔マウスの発育状態を観察したが、400日齢現在、仔マウスの発症は認められない。CJD♂マウスからの感染も認めていない。〔実験2・新生仔マウスへの接種〕生後3、7、21、28日齢のマウス腹腔内にCJD株を接種し、症状発現までの期間を観察した結果、いずれの日齢群でも240-270日の間に発症した。〔実験3:感染マウスの胎盤、胎児脳、精子、精液の感染性の検索〕妊娠CJDマウスから採取した胎児と胎盤、感染♂マウスの精子と精液の感染性を検索した。母マウスの脳と脾臓は100%感染性を示しが、胎盤と胎児脳には370日現在感染性は認めていない。発症直前の15週目で採取した精子、精液にも感染性はない。Western blotによりPrP^<OJ>の検出を試みたが、PrP^<OJ>がCJD接種母マウスの脳で検出されている場合でも、その胎盤と胎児脳にPrP^<OJ>は検出されなかった。〔結論:感染因子への感受性に年齢差は無い。周産期感染の結論は次年度に得られる。

研究计划中，我们首先启动了蛋白质二维电泳实验，并根据我们之前报道的克雅氏病（CJD）孕妇的研究结果，进行了围产期克雅氏病感染的新研究通过实验检验了风险。图1：结合非平衡pH梯度电泳和SDS-PAGE分析小鼠大脑中12个蛋白质点随时间的变化，结果显示，正常组中3个蛋白质点保持不变，但感染组中显着增加。我们能够确定这个地点。目前正在进行包括氨基酸序列在内的结构分析。 2：关于围产期和母体感染的可能性 [实验1-寻找母体和父体传播] 由感染的♀小鼠产下的幼鼠由真正的CJD母鼠、正常母鼠（寄养母鼠）和正常小鼠产下的幼鼠喂养。接种克雅氏病母鼠（寄养我们观察了三例与母亲（母亲）一起饲养的幼鼠的发育状况，截至400日龄，幼鼠均未观察到任何疾病迹象。在 CJD♂ 小鼠中未观察到感染。 [实验2-对新生小鼠的接种] 将CJD株腹腔内接种到出生后3、7、21和28天的小鼠中，观察直到出现症状为止的时间。症状发生在270天内。 [实验3：在感染小鼠的胎盘、胎儿大脑、精子和精液中寻找感染性] 我们在从怀孕的克雅氏病小鼠中收集的胎儿和胎盘以及从感染的雄性小鼠中采集的精子和精液中寻找感染性。母鼠的大脑和脾脏100%具有传染性，但胎盘和胎儿大脑在370天时没有传染性。 15 周（症状出现前）收集的精子和精液也不具有传染性。我们尝试通过蛋白质印迹检测 PrP^<OJ>，但即使在接种 CJD 的母鼠大脑中检测到 PrP^<OJ>，但在胎盘和胎儿大脑中未检测到 PrP^<OJ>。 [结论：对传染原的易感性不存在年龄差异。围产期感染的结论将于明年得出。