エルシニア菌由来のスーパー抗原性産物の構造-機能相関に関する研究

耶尔森菌超抗原产物构效关系研究

基本信息

批准号：
07857022
负责人：
秋山徹
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

筆者らのグループはYersinia pseudotuberculosis感染症(エルシニア感染症)の原因菌であるY. pseudotuberculosisからスーパー抗原性を有する新規のエルシニア産物、Y. pseudotuberculosis-derived mitogen(YPM)を精製し、その遺伝子をクローニングすることに成功している。YPMはエルシニア感染症における生体の異常反応の発症に重要な役割を果たしていると考えられる。このメカニズムの解析、特に機能部位の特定を目的とする解析を行い、以下の成果を得た。1.得られたypm遺伝子の配列および推定アミノ酸配列をデータベースに登録された種々のタンパク質のそれと比較したが、相同性を有する配列を持つタンパク質は見いだされなかった。YPMは既知の細菌性スーパー抗原に比べ分子量が小さいことを考え合わせると、YPMの解析を行うことにより、これまでに得られた既知の細菌性スーパー抗原のそれとは異なる新たな知見が得られる可能性が高い、と考えられた。2.ypm遺伝子の配列を元に、YPMタンパク質の大量発現系を構築した。天然型YPMの場合と比較して、はるかに簡便な方法で、且つ約100倍の収量で純品のYPMタンパク質の調整を可能にした。得られた組換えYPMは天然型と同様の生理活性を保持していた。3.1の結果からYPMの機能部位特定に既知の細菌性スーパー抗原との相同性に基づいた方法は取りにくいことが明らかとなった。そこで、機能部位特定のため、特定の領域をN末端から順次欠損したYPM(欠損YPM)を作製することとし、2で構築した大量発現系を用いて欠損YPMの発現・精製系の構築を試み、複数種の欠損YPMの調整に成功している。現在、複数の欠損YPMを用いて、ヒト末梢リンパ球に対するマイトジェン活性、MHCクラスII分子との結合性等について解析中である。

我们的小组已成功纯化了一种新型的超级抗原Y.假性结核病衍生的有丝分裂原（YPM），这是一种具有超级抗原性的新型Yersinia产品，来自Y. pseudotuberculculisoise，是Yersinia pseudotuberculcolisia，yersinia pseudotuberculculisosis感染（Yrsinia Incotection yrsinia Incotection yrsinia yersinia and closinia and Cloned and Cloned and Cloned and thee egend thee egened and thee and thee。人们认为，YPM在耶尔森氏菌感染异常生物反应的发展中起着重要作用。对该机制进行了分析，特别是为了识别功能位点的目的，并获得了以下结果。 1。将所得的YPM基因序列和推导的氨基酸序列与数据库中注册的各种蛋白质的序列进行了比较，但没有发现具有同源序列的蛋白质。考虑到YPM的分子量比已知的细菌超抗原的分子量较小，因此人们认为，通过进行YPM分析，很有可能可以获得与已知的细菌超抗原最新的新发现不同的发现。 2。基于YPM基因序列，构建了YPM蛋白的大规模表达系统。与天然YPM相比，纯YPM蛋白可以以更轻松的方式进行调整，并以大约100倍的产率进行调整。由此产生的重组YPM保留了与天然形式相同的生理活性。 3.1的结果表明，很难使用基于与已知细菌超抗原的同源性的方法来识别YPM的功能位点。因此，为了识别功能位点，是为了从N端创建特定区域（缺陷YPM），并尝试使用2构建的大规模表达系统来构建有缺陷的YPMS的表达系统和纯化系统，并成功调节多种类型的有缺陷的YPM。目前，正在使用多个有缺陷的YPM来分析针对人外周淋巴细胞的有丝分裂活性，与MHC II类分子的结合特性等等。