老化細胞の分泌する新規老化誘導因子の機能解析

衰老细胞分泌的新型衰老诱导因子的功能分析

基本信息

批准号：
21H02693
负责人：
秋山徹
金额：
$ 11.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、老化に関与する可能性がある分泌タンパク質としてNTを見出したので、NTが老化・代謝・がん化に与える影響をさらに具体的に明らかにすることを目的として研究を進めた。本年度までの研究成果から、NTはヒト線維芽細胞IMR90細胞の老化を惹起する機能を有することを示唆する結果が得られている。本年度は、まずNT欠損マウス胎児より調製したMEFを用いた解析を行った。その結果、NT欠損マウス由来のMEFでは継代数の増加に伴う細胞老化が抑制されることを見出した。続いて、NT欠損マウス個体レベルでの解析を試みた。NT欠損マウスは通常飼育下では野生型と比べて体重に変化は無く、雌雄ともにインスリン感受性にも差は認められなかった。そこで、脂肪組織に対して生理的な条件下で老化を引き起こすために高脂肪食負荷を行い、インスリン感受性の変化を検討した。その結果、NT欠損雄マウスでは高脂肪食負荷時において、インスリン感受性が改善しており、そのことは血中Hb1Ac値の低下からも確認された。さらに、脂肪組織における老化シグナルの発現を確認したところ、NTM欠損マウスの脂肪組織ではIL-6などの老化関連遺伝子の発現減少が確認された。そこで、NTの阻害剤は抗老化・糖尿病の治療薬になりうるという仮説の下、NTに対する中和抗体の作製を試みた。NTリコンビナントタンパク質もしくはNTM強制発現細胞をマウスに免疫したのちに、抗体産生ハイブリドーマを作成し、抗NTモノクローナル抗体を生産するクローンを選択した。得られたモノクローナル抗体をIMR90細胞に作用させたところ、Ras強制発現に伴う老化惹起を緩和する効果を有するクローンが見出された。したがって、我々はNTMに対する中和抗体の取得に成功したと考えられる。

由于我们发现 NT 作为一种可能与衰老有关的分泌蛋白，我们进行了研究，旨在更具体地阐明 NT 对衰老、代谢和癌变的影响。截至今年的研究结果表明，NT具有诱导人成纤维细胞IMR90细胞衰老的能力。今年，我们首先使用 NT 缺陷小鼠胎儿制备的 MEF 进行了分析。结果，我们发现，随着传代次数的增加，来自 NT 缺陷小鼠的 MEF 抑制了细胞衰老。接下来，我们尝试在 NT 缺陷小鼠的个体水平上分析结果。在正常圈养下，与野生型小鼠相比，NT缺陷小鼠的体重没有变化，雄性和雌性之间的胰岛素敏感性也没有差异。因此，为了在生理条件下诱导脂肪组织的老化，对脂肪组织进行高脂肪饮食，并检查胰岛素敏感性的变化。结果，NT 缺陷的雄性小鼠在摄入高脂肪饮食时，胰岛素敏感性得到改善，血液 Hb1Ac 水平降低也证实了这一点。此外，当我们确认脂肪组织中衰老信号的表达时，我们发现NTM缺陷小鼠的脂肪组织中衰老相关基因（例如IL-6）的表达降低。因此，我们假设 NT 抑制剂可以用作抗衰老和抗糖尿病药物，并尝试创建针对 NT 的中和抗体。用NT重组蛋白或强制表达NTM的细胞免疫小鼠后，产生产生抗体的杂交瘤，并选择产生抗NT单克隆抗体的克隆。当将获得的单克隆抗体应用于IMR90细胞时，发现了具有减轻Ras强制表达引起的衰老作用的克隆。因此，我们相信我们成功获得了针对 NTM 的中和抗体。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

がん微小環境に１細胞レベルで挑む

在单细胞水平上应对癌症微环境

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kunihiro Y;Tanaka N;Kawano R;Yujiri T;Ueda K;Gondo T;Kobayashi T;Matsumoto T;Ito K.;藤田　直也
通讯作者：
藤田　直也

SIPA1L1/SPAR1 Interacts with the Neurabin Family of Proteins and is Involved in GPCR Signaling

DOI：
10.1523/jneurosci.0569-21.2022
发表时间：
2022-03-23
期刊：
JOURNAL OF NEUROSCIENCE
影响因子：
5.3
作者：
Matsuura, Ken;Kobayashi, Shizuka;Akiyama, Tetsu
通讯作者：
Akiyama, Tetsu

Altered cervicovaginal microbiota in premenopausal ovarian cancer patients

绝经前卵巢癌患者宫颈阴道微生物群的改变

DOI：
10.1016/j.gene.2021.146083
发表时间：
2022
期刊：
Gene
影响因子：
3.5
作者：
Morikawa Asuka;Kawabata Ayako;Shirahige Katsuhiko;Akiyama Tetsu;Okamoto Aikou;Sutani Takashi
通讯作者：
Sutani Takashi