生体高分子構造解析の国体NMRによる二面角決定法の開発

开发利用国家核磁共振测定生物聚合物结构分析二面角的方法

基本信息

批准号：
06858070
负责人：
藤原敏道
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Yokohama National University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

高い感度と分解能の得られるマジック角試料回転条件下の固体分子について、距離情報だけでなく二面角など角度情報を多次元NMRを用いて得ることを試みた。この方法は、核スピン間で磁化を移動させることを通じて、異なる原子の異方的な核スピン相互作用の相対的な配向を決めて角度情報を得ようとするものである。実験の中心的な部分は二次元NMRであり、異なった核スピンの異方的相互作用の展開を磁化移動の期間で結びつけたものである。これによって異なった核の異方的相互作用についての二面角に依存する相関スペクトルが得られる。この実験を実現するためにマジック角試料回転条件で異方的な相互作用を測定するための新しいラジオ波パルス列を2種開発した。一つのパルス系列はCHあるいはNHなどの双極子相互作用が高速試料回転下でも有効に働くようにしたもので、もう一つは化学シフト異方性が働くようにしたものである。この開発にはコンピュータによるNMRシミュレーションを用いた。実験用のラジオ波多重パルス系列は、オフセットやラジオ波の不均一性によって実験結果が影響されず、感度が高く二面角に敏感になるように設計した。実験では、この方法を^<13>Cでラベルしたアミノ酸に適用し、タンパク質の主鎖に相当する二面角を決めることを試みた。現在、実験結果がシミュレーションとよく一致しているという結果が得られている。

我们尝试使用多维NMR，不仅尝试获取距离信息，还可以获取诸如二面角度的角度信息，例如在魔术角样本的旋转条件下，具有高灵敏度和分辨率的固体分子。该方法试图通过确定不同原子的各向异性核自旋相互作用的相对取向来获得角度信息，通过转移核自旋之间的磁化。实验的中心部分是二维NMR，它将不同核自旋在磁化转移时期内的各向异性相互作用的发展联系起来。这给出了不同核的各向异性相互作用的二面角依赖性相关光谱。为了意识到这一实验，开发了两次新的无线电波脉冲序列，以测量在魔术角样品旋转条件下的各向异性相互作用。一个脉冲序列使得偶极相互作用（例如CH或NH）即使在高速样品旋转下也有效，而另一个偶极相互作用也使化学移动各向异性有效。该开发使用基于计算机的NMR模拟。实验性射频多脉冲序列被设计为对二面角高度敏感，而不会影响辐射频率的偏移和不均匀性引起的实验结果。在实验中，该方法应用于标记为 ^<13> c的氨基酸，并试图确定与蛋白质主链相对应的二面角。目前，已经发现结果与模拟非常吻合。