癌の悪性度、特に転移能に関与する遺伝子の検索・同定とその生物学的機能解析

癌症恶性尤其是转移潜能相关基因的搜索和鉴定及其生物学功能分析

基本信息

批准号：
01015078
负责人：
谷口俊一郎
金额：
$ 4.42万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)ラット形質3Y1細胞に、yーfosを導入すると肺転移能が増強することを示してきた。転移能増強の要因を細胞生物学的に解析した結果、受容細胞がsre形質転換細胞の場合は運転能昂進を伴う浸潤能の増強等が一要因であると示唆される結果を得た。更に運動能の増費に伴うアクチン関連蛋白質(低分子型トロポミオシン等)の発現変化、lysosomal enzymeの一つであるプロカテプシンLの発現及び分泌の増強等を観察した。又、fos導入による高転移性獲得細胞のcDNAライブラリーを作製し受容細胞よりも発現が増強している数個のcDNAクローンを得た。それらは従来報告のないものを含みlysosomeに存在する蛋白質やtranslationに関与するelorgation factor 1等に対応するものであった。(2)マウスB16黒色腫で発見した新種アクチン(A^xをbetamと改名)が転移能抑制的に働くことを、cDNA導入実験で示し、この際、他アクチン関連蛋白質(低分子型tropomyosinやvinculin)の同時発現変化を観察した。また、betamに対する特異抗体を作製し、betamcDNAに対応するアクチンタンパク質が細胞内に存在し、細胞内アクチンフィラメントに取り込まれていることを確認した。アクチンの種類はbetamと異なるが(平滑筋型alphaアクチン)、やはり悪性化に伴う第3アクチンの発現変化をヒト色素組織及びラット3Y1細胞で観察した。3Y1細胞に於いては抗alphaアクチン抗体で染色するとalphaアクチンがアクチンフィラメントに取り込まれていることそしてalphaアクチンcDNAを導入発現させることによってアクチンフィラメントの回復および浸潤能の減少を観察した。以上の如く、異なった細胞系で、細胞の形態変化や運動性に関与する細胞骨格蛋白質の遺伝子が転移能関連遺伝子として示唆された。これらの蛋白質あるいは遺伝子の機能及び発現制御の解明が今後の課題である。

（1）已经表明，将Y-Fos引入大鼠性状3Y1细胞会增强肺转移性潜力。发现增强转移潜力的因素的细胞生物学分析表明，当受体细胞被SRE转换细胞时，一种因子是增强的侵入性能力，并且类似因素具有增强的侵入性能力，并伴随着提高驱动能力。此外，观察到观察到溶酶体一种酶之一，由于运动性的增加，肌动蛋白相关蛋白的表达变化（小分子真菌素等）以及protathepsin l的表达和分泌增加。此外，与受体细胞相比，FOS高度转移积累的细胞cDNA库源具有高度转移性的cDNA克隆。这些是先前没有报道的那些，并与溶酶体和ELORGATION因子1中存在的蛋白质相对应，该蛋白涉及翻译。（2）在cDNA引入中，实验表明，在小鼠B16黑色素瘤中发现的新型肌动蛋白（将A^X重命名为β）作用着抑制转移性潜力，在此实验中，我们观察到其他肌动蛋白相关蛋白的共表达变化（小分子曲霉霉素和vinculin）。此外，还产生了针对β的特异性抗体，以确认在细胞中存在与βDNA相对应的肌动蛋白，并掺入细胞内肌动蛋白丝中。尽管肌动蛋白的类型与β（平滑肌型肌动蛋白）不同，但在人类色素组织和大鼠3Y1细胞中也观察到了恶性后第三肌动蛋白表达的变化。在3Y1细胞中，用抗α肌动蛋白抗体染色显示α肌动蛋白已掺入肌动蛋白丝中，并且通过转导和表达α肌动蛋白cDNA来降低肌动蛋白丝的恢复和侵入性能力。如上所述，已经建议参与不同细胞系中细胞形态变化和运动性的细胞骨架蛋白基因作为转移性潜在基因。未来的挑战是阐明这些蛋白质或基因的功能和表达控制。