指向性蛋白含有リポゾームとの結合によるアデノウィルスの細胞選択的導入法の開発-血小板膜糖蛋白GPIbを利用した傷害血管選択的遺伝子導入法の開発-

开发通过与含有靶向蛋白的脂质体结合而将腺病毒选择性导入细胞的方法 -开发利用血小板膜糖蛋白GPIb的损伤血管的选择性基因导入方法-

基本信息

批准号：
09877135
负责人：
上野光
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.Dominant-negative H-Ras発現アデノウイルス、Cyclin-dependent kinaseInhibitor-p21WAF1/Sdi1発現ウイルス、C-type natriuretic peptide発現ウイルスを作製し、ラット頚動脈のバルーン傷害モデルに応用したところ肥厚病変の形成を阻止できた。組織因子の特異的抑制物質であるTissue factor pathway inhibitor(TFPI)産生ウイルスを傷害血管壁に導入したところ血栓形成を完全に抑制することができ、血栓症の遺伝子治療の可能性を示した。2.アデノウイルスとリピッドの結合に関して:リピッドの電荷を正、負、中性と準備しさらにリポソームの粒子径やウイルスとの混合時間、条件などを検討する予定であったが、各種リピッドの調製に手間取り現時点では十分な情報を得ることができていない。ミドリ十字血漿蛋白研究所の協力を得て研究開発の予定であったが同社の組織改変があり研究体制に空白が存在したことも遅れの一因となった。ようやくリピッドが準備できたので基礎検討を継続する。3.血小板膜糖蛋白1bを埋め込んだリピッド球とウイルスとの結合を計画していたが、基礎検討の遅れからまだ開始できていない。共同研究者の池田は血小板膜糖蛋白1bの一部を組換え蛋白として精製しリポゾームに埋め込むことにすでに成功しているので、上記の検討が終了しだい早期に計画の実行が可能と考えられる。以上、一部計画の予想外の遅れから本年度の研究は計画どおりには進まなかったが、研究計画は将来の遺伝子治療や新たな薬物デリバリーシステムの開発に向けて先駆的かつ重要であり、ひき続き検討を続けることで関係者の意志は統一されている。今後の基礎研究により必ずや一定の成果に繋がるものと期待できる。

1. 构建显性阴性表达H-Ras的腺病毒、表达Cyclin依赖性激酶抑制剂-p21WAF1/Sdi1的病毒和表达C型利尿钠肽的病毒，并将其应用于大鼠颈动脉球囊损伤模型，抑制了形成增厚的病变，我能够做到。当将产生组织因子途径抑制剂（TFPI）的病毒（TFPI）（一种组织因子的特异性抑制剂）引入受损的血管壁时，可以完全抑制血栓形成，这表明了血栓形成基因治疗的可能性。 2.关于腺病毒与脂质的结合：我们本来计划制备带正电、负电、中性电荷的脂质，然后考察脂质体的粒径、与病毒的混合时间、条件等，但各种脂质的制备目前，我们无法获得足够的信息。原本计划与绿十字血浆蛋白研究所合作进行研发，但由于公司组织变动，研究体系出现了缺口，这也是造成延期的原因之一。现在Lipid终于准备好了，我们将继续基础研究。 3.我们本来计划将病毒与嵌入血小板膜糖蛋白1b的脂质球结合起来，但由于基础研究的拖延，我们还没有开始。由于共同研究员Ikeda已经成功将血小板膜糖蛋白1b的一部分纯化为重组蛋白并将其嵌入脂质体中，因此认为一旦上述研究完成，该计划就有可能实施。如上所述，虽然今年的研究由于一些计划的意外延误而没有按计划进行，但通过不断的考虑，该研究计划对于未来基因治疗和新药物输送系统的发展具有开创性和重要意义，是有关各方的意愿。各方已统一。可以预见，未来的基础研究一定会取得一定的成果。