慢性ヘリコバクターピロリ感染症に対する内因性殺菌ペプチド遺伝子導入療法の開発

内源性杀菌肽基因转移疗法治疗慢性幽门螺杆菌感染的进展

基本信息

批准号：
08877086
负责人：
高後裕
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は,萌芽的研究費補助金により以下の研究結果を得た.(1)まずPR-39 oligopeptideのE.coliに対する抗菌能をMinimum Inhibitory Concentration(MIC)にて測定した.その結果は0.83-1.7mMと従来の報告と一致した.次に,Helicobacter pylori(H.pylori)に対するPR-39の抗菌能をPR-39 oligopeptideによるMICにて測定した.H.pyloriはAmerican Type Culture Collectionより得た3株(ATCC43504,ATCC43579,ATCC43629)および臨床的に得られた34株を用いた.PR-39 oligopeptideのこれらH.pyloriに対するMICは6.7-13.4mMであり,E.coliに対すると比較して10倍程度低くはあるが,PR-39のH.pyloriに対する抗菌作用が証明された.(2)今回の研究の最終目的であるPR-39遺伝子を用いたH.pylori除菌の遺伝子治療の実験を開始した.RT-PCR法を用いてブタ小腸粘膜のmRNAよりPR-39のcoding regionをすべて含むcDNAを作成し,adenovirus vectorであるpAdex1CAwtに組み込んだ.PR-39を組み込んだadenovirus vectorをH.pyloriが感染している胃の粘膜上皮細胞に感染させることにより最低2-3週間はPR-39が産生,分泌され,H.pyloriに対して抗菌作用を及ぼすと考えている.(3)H.pylori除菌の遺伝子治療のモデルとして現在H.pyloriの感染が報告されているスナネズニを用いた.スナネズニの胃にH.pyloriを感染させると約3か月で胃炎を起こしH.pyloriの持続感染が成立することが確認された.現在このH.pyloriに感染したスナネズニの胃にPR-39を組み込んだadenovirus vectorを感染させ,H.pylori除菌の効果を検討中である.

我们利用探索性研究经费获得了以下研究结果 (1) 首先，我们使用最低抑菌浓度 (MIC) 测量了 PR-39 寡肽对大肠杆菌的抗菌能力。结果为 0.83- PR- 的抗菌活性。 39针对幽门螺杆菌（H. pylori）的浓度为1.7mM，这与之前的报道一致。使用从美国典型培养物保藏中心获得的三种幽门螺杆菌菌株（ATCC43504、ATCC43579、ATCC43629）和 34 种临床获得的菌株通过 MIC 进行测量。PR-39这些寡肽对幽门螺杆菌的 MIC 为 6.7-13.4mM，比对大肠杆菌的 MIC 低约 10 倍，但 PR-39 对幽门螺杆菌的抗菌活性已得到证实 (2)。利用PR-39基因根除幽门螺杆菌的基因治疗实验，是本研究的最终目标。我们已经开始利用RT-PCR方法，利用猪小肠粘膜的mRNA编码PR-39。创建了包含整个区域的 cDNA，并将其整合到包含 PR-39 的腺病毒载体 pAdex1CAwt 中。我们认为，通过用该载体感染感染幽门螺杆菌的胃粘膜上皮细胞，PR-39产生并分泌至少2-3周，对幽门螺杆菌发挥抗菌作用(3)目前幽门螺杆菌。用作根除幽门螺杆菌的基因治疗模型。利用已报告感染的幽门螺杆菌证实，如果沙狗的胃部感染幽门螺杆菌，大约3个月后就会出现胃炎，导致持续感染幽门螺杆菌腺病毒。感染沙藻的胃中的 PR-39我们目前正在研究使用幽门螺杆菌载体感染根除幽门螺杆菌的有效性。