培養中枢ニューロン間シナプス形成過程の解析と機能分子の同定

培养中枢神经元突触形成过程分析及功能分子鉴定

基本信息

批准号：
63638007
负责人：
黒田洋一郎
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.培養大脳皮質ニューロン間のシナプス形成とその定量的観察に成功し、グルタミン酸を伝達物質とする興奮性シナプスにより、多数のニューロンが同期した発火を起こしていることが判明した。2.このシナプス形成系を用い、細胞膜を透過しない蛋白質リン酸化酵素阻害剤(K252b)を長期添加したところ、ニューロンの同期発火が抑制された。大脳皮質ニューロン間のシナプス形成過程に、Ecto-protein Kinase(細胞外に活性中心をもつ蛋白質リン酸化酵素)が関与していることが示唆され、新しい機能分子の存在が明らかにされた。3.培養海馬ニューロン間のシナプス形成系に、PC-12細胞の細胞表面分子に対するモノクローナル抗体ライブラリーを順次長期添加し、シナプス形成に対する影響を検討したところ、47-67を始めとするモノクローナル抗体で、シナプス形成に関する抑制効果が見られた。ここでも、未知のシナプス形成に関与する分子の存在が示唆された。4.培養海馬ニューロン間のシナプス形成系に見られる多数のニューロンの同期した発火のメカニズムの解析として、細胞外カルシュウム濃度を低下させ、シナプス伝達の遮断を行った。シナプス伝達が停止した状態でも、いくつかのニューロンは、同期しない発火を示した。ニューロン回路網の同期した発火は、これらの自発発火ニューロンの活動が、形成されたシナプスを介して、回路網全体に広がったためであることが判明し、この同期した発火をシナプス形成の定量的解析に用いることの安当性が支持された。

1。培养脑皮质神经元与其定量观察之间的成功突触形成，发现使用谷氨酸作为一种透射物质的兴奋突触导致大量神经元同步。 2。使用此突触形成系统，将未传输细胞膜（K252B）的蛋白磷酸抑制剂（K252B）抑制为神经元同步。有人提出，Ecto-蛋白激酶（一种具有活性中心的蛋白质氧化酶外部细胞外的蛋白氧化酶）参与了脑皮质神经元之间的突触形成过程，从而揭示了新功能分子的存在。 3。在PC-12细胞的细胞表面分子上，培养的海马神经元依次添加了单克隆抗体文库，并长时间添加了对突触形成的影响。同样，提出了参与未知突触形成的分子的存在。 4。作为对在培养物和海马神经元中发现的突触形成系统中许多神经元同步机制的分析，降低了细胞间钙浓度，并关闭了突触传递。即使在突触传播的悬架中，一些神经元也会显示出不会同步的火。已经发现，神经元电路网络的同步通过形成的突触活动扩散在整个电路网络中，而这种同步的火灾是定量分析。