シナプス形成・維持・再生におけるガングリオシドの役割

神经节苷脂在突触形成、维持和再生中的作用

基本信息

批准号：
03255222
负责人：
黒田洋一郎
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Wistarラット18日胚から調整した培養大脳皮質に、培養2日目よりendoglycocerami dase II(EGCase)を5mU/200μm(25mu/ml)の量で添加した。酵素添加した4例中1例はそのまま培養7日目まで酵素を入れ続け、もう3例は培養3日目に全培養液を交換し酵素を除いた。さらに、培養3日目に酵素を除いたものの内、1例はそのまま何も加えず7日目まで培養、残り2例には3日目よりガングリオシドGQ1b(一つは0.2μg/ml、もう一つは3.2μg/ml)を添加した。これらの条件下で7日目まで培養した後、furaー2を用いた細胞内[Ca^<2+>]多点同時測定システムを使い、自発的に出現する細胞内Ca^<2+>変動のパタ-ンを解析した。培養7日目における細胞内Ca^<2+>変動のパタ-ンを解析し、その振動数を求めたところ、無添加コントロ-ルに比べ培養2日目から7日目まで酵素を添加し続けたものは、著しく振動数が低下した(コントロ-ル8.6×10^<-2>Hzに対して1.2×10^<-2>Hz)。また、酵素を2日目から3日目まで添加したものも振動数の低下が見られた(5.5×10^<-2>Hz)が、酵素を入れ続けたものに比べてその減少の幅は小さかった。さらに、この1日の酵素処理後、培養3日目よりGQ1bを添加してみたが、酵素処理のみのものよりも振動数はより低下し、GQlbの濃度が高い方がいっそう振動数の減少が顕著であった。

将内生糖果Dase II（EGCASE）添加到从Wistar大鼠的第18天胚胎中制备的培养的脑皮质中，培养第二天的含量为5m/200μm（25mu/ml）。在培养的第七天之前，继续使用添加酶的四种情况之一，而在培养的第三天，将其他三种情况替换为整个培养基，以去除酶。此外，在培养的第三天去除的酶中，培养了一个病例，直到第七天，没有添加任何东西，其余两个病例从第三天开始添加了神经节GQ1B（一个为0.2μg/ml，另一个为3.2μg/ml）。在这些条件下在第7天进行培养后，使用使用Fura-2的细胞内[Ca^<2+>]多个系统同时测量了细胞内[Ca^<2+>]多点的多个多点的多点测量，从而分析了自发出现的细胞内Ca^<2+>变化模式。分析了培养第七天的细胞内Ca^<2+>波动的模式，并确定了频率。与无添加剂对照相比，当酶从第二次到培养的第七天（1.2×10^<-2> Hz与对照8.6×10^<-2> Hz）时，酶的频率显着降低。此外，还认为从第二天到第三天添加的酶的频率减少（5.5×10^<-2> Hz），但降低小于继续添加的酶。此外，在酶治疗当天后，在培养的第三天添加了GQ1B，并且频率低于仅酶处理的频率，并且当GQLB较高时，频率降低了更大的降低。