Sept8とSept14をモデルとした新奇G蛋白質セプチンの神経機能の解析

以Sept8和Sept14为模型分析新型G蛋白septin的神经元功能

基本信息

批准号：
20054026
负责人：
永田浩一
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

Sept14は神経特異的な発現を示すSeptinファミリーのメンバーで、発生過程の大脳皮質の形成過程において必須の役割を果たす。すなわち、胎生期マウスの脳室帯細胞でのSept14の発現抑制を行うと、皮質錐体神経細胞の遊走過程における異常が生じた。その結果、Sept14発現抑制細胞が局在の異常および形態的な異常を示した。一方、神経幹細胞の分化過程はSept14の発現抑制による影響を受けなかった。さらに、この分子メカニズムを解明する目的で相互作用分子のスクリーニングを行い、Septinファミリー分子Sept4を見出した。Sept14とSept4は脳組織において相互作用した。胎児期のマウス脳でSept4を発現抑制すると、Sept14の発現抑制の場合と非常に良く似た表現型が観察され、神経細胞の移動と形態の異常が観察された。さらに、神経細胞の正常な移動には、内在性のSept14とSept4の相互作用が必須であることも判明した。Sept8は、ラット脳の発達に伴って増加し、神経細胞のシナプスに存在するSeptinである。そこで、Sept8の神経における生理機能を個体レベルで明らかにすることを目指し、Sept8のノックアウトマウスの作成を試みている。これまでにfloxedマウスの作成を完了し、現在、神経組織特異的なコンディショナル・ノックアウトマウスの作成に着手している。さらにホモの欠損マウスも作成中であり、順調な経過を辿っている。

Sept14 是 Septin 家族的成员，表现出神经元特异性表达，并在发育过程中大脑皮层的形成中发挥重要作用。换句话说，抑制胚胎小鼠心室区细胞中Sept14的表达会导致皮质锥体神经元迁移过程异常。结果，Sept14 表达受到抑制的细胞表现出异常的定位和形态。另一方面，抑制Sept14表达并不影响神经干细胞的分化过程。此外，为了阐明这种分子机制，我们筛选了相互作用的分子并发现了Septin家族分子Sept4。 Sept14 和 Sept4 在脑组织中相互作用。当Sept4表达在胎鼠脑中被抑制时，观察到与Sept14表达被抑制时非常相似的表型，神经元迁移和形态异常。此外，内源性 Sept14 和 Sept4 之间的相互作用被发现对于正常神经元迁移至关重要。 Sept8 是一种 Septin，随着大鼠大脑的发育而增加，存在于神经元突触中。因此，我们试图构建Sept8基因敲除小鼠，旨在在个体水平上阐明Sept8在神经中的生理功能。到目前为止，我们已经完成了floxed小鼠的创建，目前正在致力于创建针对神经组织的条件性基因敲除小鼠。此外，纯合缺失小鼠也在培育中，进展顺利。