オートファジーによるポリグルタミンタンパク質の分解

自噬对多聚谷氨酰胺蛋白的降解

基本信息

批准号：
20023018
负责人：
吉森保
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20023018/
关键词：
ポリグルタミン病異常伸張ポリグルタミン鎖オートファジー CCT p62 凝集

项目摘要

ポリグルタミン病などの異常タンパク質蓄積が原因となる疾患においては、細胞による当該タンパク質の分解が発症抑止に極めて重要である。細胞内のユビキチン・プロテアソーム系がそのような異常タンパク質の分解にあたることはよく知られているが、それと並ぶ細胞内分解系であるオートファジーも、異常伸張ポリグルタミン鎖含有タンパク質(PolyQ)の凝集塊を分解するという報告が近年相次いだ。PolyQはプロテアソーム活性を阻害すると言われており、PolyQ分解におけるオートファジーの重要性が注目される。そのような状況下で我々は、PolyQが凝集する以前の可溶性の段階でオートファジーを強く誘導することを見いだした。疾患を起こさない短いポリグルタミン鎖を含むタンパク質は全く誘導を起こさない。本研究は、オートファジーがどのようにしてPolyQの出現を特異的に感知し分解するのかその分子メカニズムに迫ることを目的とする。平成20年度は、PolyQへの結合が報告されているシャペロンCCTについてノックダウン実験を行ったが、PolyQによるオートファジー誘導は阻害されず、CCTはオートファジー誘導因子ではないと結論した。また別の誘導因子候補p62については、そのノックアウト細胞においてPolyQの発現をオンオフできる系を用いて解析を行っているが、明白な結果を得るに至っていない。凝集までに時間がかかるチオレドキシン融合PolyQを大腸菌で合成させ精製し、種々の時間イジキュベートしてから細胞に注入しどれが最もよくオートファジーを誘導するかを調べると同時に,各時間のpolyQコンフォメーションを円偏光2色性測定で解析したが、今のところインキュベート時間により誘導能に差が見られずさらなる解析を行っている。

在由异常蛋白积累（例如多谷氨酰胺疾病）引起的疾病中，细胞对细胞的分解对于在发作时阻止非常重要。众所周知，细胞中的泛素蛋白体系统对应于这种异常蛋白质，但是自噬是一种细胞分解系统，也是近年来含有多谷氨酰胺链的异常拉伸蛋白。拆卸。据说PolyQ抑制了原生活性，并且注意到自噬在PolyQ分解中的重要性。在这种情况下，我们发现PolyQ在聚集聚集之前会在溶液阶段强烈诱导自噬。一个含有短谷氨酰胺链的蛋白质根本不会引起疾病。这项研究的目的是接近自噬如何特异性变质和分解Polyq的外观的分子机制。 2008年，在伴侣CCT上进行了敲低实验，该实验据报道与Polyq键合，但得出结论认为Polyq的自噬诱导没有被抑制，并且CCT并不是自噬指南。使用可以打开和关闭敲除细胞中Polyq表达的系统分析了另一个诱导因子候选p62，但尚未获得明显的结果。固定的硫氧还蛋白融合polyq由大肠杆菌合成，纯化，其中不同的时间注射细胞，检查哪一个是自噬的最佳诱导，同时，尽管分析是分析的通过圆形极化两个颜色规范测量进行了分析，已经进行了进一步的分析，没有由于孵育时间而没有任何指导差异。