染色体末端の維持機構を標的とした癌分子治療法の開発

针对染色体末端维持机制的癌症分子治疗的发展

基本信息

批准号：
18015047
负责人：
清宮啓之
金额：
$ 6.91万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

テロメラーゼ阻害剤の制がん効果は標的がん細胞のテロメア短縮を介するが、最近ではテロメア短縮に依存しない新たな制がん機序の存在も示唆されている。本研究は、がん分子標的治療への応用を目指す立場から、染色体末端維持機構の修飾によって生じる細胞応答を明らかにすることを目的とし、以下の成果を得た。1.テロメラーゼ阻害剤MST-312の新たな制がん機序MST-312のがん細胞増殖抑制効果は、テロメアが短いがん細胞ほど顕著に認められた。MST-312高感受性がん細胞株では、処理後短時間のうちにテロメアにDNA損傷応答因子が集積し、また、テロメアを検出限界以下まで消失した染色体末端が頻出した。一方、ヒトがん細胞としては例外的に極めて長いテロメアを保持したがん細胞株を複数同定し、これらの細胞株もMST-312に高感受性を示すことを見出した。染色体像を観察したところ、同剤は非テロメア部位にもDNA二本鎖切断を生じさせることが明らかになった。2.がん細胞におけるテロメラーゼの新機能テロメラーゼ触媒サブユニットhTERTを過剰発現したがん細胞株を樹立し、同酵素活性の増強とテロメア伸長を確認した。このときの遺伝子発現変化をGeneChipアレイにて網羅的に解析した。対照としてテロメア伸長因子タンキラーゼ1の過剰発現株を樹立し、同様にアレイデータを取得した。siRNAによるhTERTのノックダウン系も確立した。これらをもとにテロメラーゼの新機能を反映した発現signatureを同定すべく、アレイデータの蓄積作業を進めた。3.テロメアフィンガープリントの描出昨年度に続き、ヒトがん細胞パネル39系におけるテロメア関連因子群の蛋白質発現を定量数値化し、データベースの拡充を進めた。標準的抗がん剤の感受性フィンガープリントとのコンペア解析を実施し、発現量と感受性が有意に相関する組み合わせを多数同定した。

端粒酶抑制剂通过缩短目标癌细胞的癌症作用，但最近提出了一种新的系统机制，不依赖于端粒的缩短。这项研究的目的是从适用于癌症分子靶靶治疗的角度来阐明通过修饰染色体终端维护机制产生的细胞反应。 1。Teromerase抑制剂MST-312新的控制癌症机制MST-312被视为短端粒的癌细胞更为突出。在MST-312高敏感的癌细胞库存中，DNA损伤反应因子在治疗后的短时间内积聚在端粒中，并且经常消失至检测极限的染色体端。另一方面，它已被鉴定为许多具有异常长的端粒的癌细胞，并且这些细胞对MST-312也表现出较高的敏感性。观察染色体雕像的观察表明，该药物还引起了非telogemeres的DNA双重切割。 2。已经建立了端粒酶在癌细胞中的新功能，以增强酶活性和端粒的扩展，端粒的延伸过度表达了HTERT，这是一种新的功能性端粒酶亚基HTERT。目前，基因表达变化通过Genechip Array全面分析。形成鲜明对比的是，建立了端粒扩展因子罐1的过量应变，并获得了阵列数据。还建立了siRNA的HTERT敲击系统。基于这些，促进了数组数据的积累，以确定反映端粒酶新功能的表达签名。 3。去年绘制远距离手指的印刷，量化了人类癌细胞39系列中与地位物相关因子基团的蛋白质表达，并扩展了数据库。实施了具有敏感指纹的标准抗癌药物的竞争分析，并确定了表达和灵敏度量显着相关的许多组合。