白血病細胞におけるチロシンホスファターゼPTP-U2の発現調節と情報伝達

白血病细胞酪氨酸磷酸酶PTP-U2表达及信号转导的调控

基本信息

批准号：
11780500
负责人：
清宮啓之
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780500/
关键词：
チロシンホスファターゼ白血病細胞分化アポトーシス

项目摘要

我々が単離したチロシン脱リン酸化酵素PTP-U2は、白血病細胞の分化に伴って発現の上昇を示す。これまでの研究により、長鎖型PTP-U2Lはある種の白血病細胞の分化・アポトーシス誘導を促進させることがわかってきた。今回、白血病細胞の分化・アポトーシスにおけるPTP-U2情報伝達経路を明らかにすることを目的として以下の実験を行った。1.PTP-U2のアミノ酸配列に注目したところ、同蛋白質は白血病発症に関与するとされるキナーゼ、Pim-1のリン酸化部位と類似したモチーフを有することが明らかになった。同領域の合成ペプチドおよび細胞から抽出したPTP-U2は、Pim-1によって実際にリン酸化を受けた。PTPーU2ペプチドに対するPim-1のリン酸化反応の効率は、これまでに同定されているPim-1の基質よりも極めて高いものであった。また、試験管内結合実験により、Pim-1とPTP-U2が複合体を形成することが確認された。興味深いことに、Pim-1によってリン酸化されたPTP-U2はホスファターゼ活性を減じることが明らかになった。今後は、Pim-1リン酸化部位変異型PTP-U2遺伝子の導入実験等により、Pim-1によるPTP-U2の機能制御の生理的意義を明らかにしたい。2.予備的検討により、PTP-U2Lは分化誘導時に発現してくる何らかの因子と協調して分化細胞のアポトーシスを誘導する可能性が示唆された。そこで、PTP-U2L結合蛋白質のツー・ハイブリッドスクリーニングを行い、幾つかの陽性クローンを単離した。今後は、細胞内におけるPTP-U2-同結合蛋白質相互作用の生理的意義の有無を検討したい。

我们所溶解的酪氨酸青少年磷酸化酶PTP-U2表明表达作为白血病细胞的分化。他的研究表明，长链PTP-U2L促进某种白血病细胞和凋亡指导。这次，进行了以下实验，目的是阐明白血病细胞中的PTP-U2信息传播途径和凋亡。 1。着眼于PTP-U2氨基酸序列，它表明该蛋白具有类似于激酶和PIM-1磷酸化位点的基序，据说这与白血病有关。从同一区域中的合成肽和细胞中提取的PTP-U2实际上是由PIM-1负责的。 PIM-1磷酸化反应对PTP-U2肽的效率非常高于迄今已鉴定出的PIM-1底物。此外，还证实了PIM-1和PTP-U2在试管实验测试中形成了复合物。有趣的是，被PIM-1氧化的PTP-U2降低了霍斯法蛋白酶活性。将来，我想通过PIM-1通过PTP-U2基因等引入实验来阐明PIM-1的PIM-1磷酸化位点PTP-U2功能控制的生理意义。 2。初步研究表明，PTP-U2L可能与分化诱导过程中出现的任何因素合作诱导分化细胞的凋亡。因此，将PTP-U2L结合蛋白的两杂化筛选打开以分离为几个阳性克隆。将来，我想检查细胞中PTP-U2综合蛋白相互作用的生理意义。