細胞周期を制御する特異的ユビキチン経路の解析

分析控制细胞周期的特定泛素通路

基本信息

批准号：
09263218
负责人：
山尾文明
金额：
$ 1.54万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09263218/
关键词：
ユビキチン細胞周期サイクリン蛋白質分解

项目摘要

分裂酵母からその本来の酵素機能を指標にユビキチン結合酵素のE2の遺伝子(cDNA)の系統的検索を行った。その結果得られたE2遺伝子の一つであるubcP4はこれまでに見つかっていない新奇なもので細胞増殖に必須であった。そこでこの遺伝子の欠損による表現型を詳細に解析したところ、その発現を抑制すると細胞周期G2期停止と、分裂中期から後期への進行が止まり染色体分離が抑制されることの2点が最終表現型であることがわかった。特に分裂中期での停止の表現型は、M期Cyclin(cdc13遺伝子産物)分解のためのE3複合体(APC:Anaphase Promoting Complex)の構成分子の一つをコードするcut9遺伝子の変異株と非常に酷似した表現型を示し、ubcP4の過剰生産によりcut9変異を抑制した。またUbcP4を枯渇させた細胞中では分裂酵母のM期サイクリンであるCdc13蛋白質が分解されずに安定化することも確かめた。これらのことからubcP4を介したユビキチン経路のターゲットの一つはM期Cyclinであり、ubcP4はサイクリン特異的ユビキチンリガーゼE3としてのAPC(またはCyclosome)と共役的に働いているE2分子と考えられた。ubcP4欠損株では、M期Cyclinと同一のAPCを介した機構で分解されると考えられている分裂中期の染色体対合の維持に必須の蛋白質の分解も抑制されるために表現型としてはM期後期進行ができなくなったと考えられる。

从拟合酵母中，将原始酶功能作为指数进行，并对泛素结合酶的E2基因（cDNA）进行系统搜索。 UBCP4是由此产生的E2基因之一，是到目前为止尚未发现的新奇怪之处，对于细胞生长至关重要。因此，当详细分析由于该基因缺乏引起的表达类型时，最终表达式类型是，如果抑制了表达式，则停止了细胞周期周期G2周期，并且从中间到下半部的进展并停止染色体的分离被抑制。特别是，在分裂中间停止的表达类型是一个Cut9基因突变体，该突变体编码E3复合物的复合分子之一（APC：APC：促进后期促进复合物），用于拆卸M周期细胞周期蛋白（CDC13基因产物）。表达类型非常相似，并且UBCP4的过量抑制了Cut9突变。还可以证实，Cdc13蛋白是叶子酵母的M-学期循环，并未分解在耗尽UBCP4的耗尽细胞中。从这些事实中，通过UBCP4的泛素路由的一个靶标之一是M-学期细胞周期蛋白，UBCP4被认为是与APC（或Cyclosom）一起用作细胞周期蛋白特异性泛素泛素连接酶E3的E2分子。对于UBCP4赤字份额，它是一种表达式类型，可以抑制蛋白质的分解，该蛋白被认为是通过与M -Term Cyclin相同的APC在机制中拆卸的。这段时期已经无法进步。