分裂酵母におけるユビキチン経路全体像の把握とプロテオーム構築

了解泛素通路的整体情况并构建裂殖酵母中的蛋白质组

基本信息

批准号：
13206077
负责人：
山尾文明
金额：
$ 2.88万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206077/
关键词：
ユビキチンタンパク質分解翻訳後修飾

项目摘要

分裂酵母でのE2、E3分子種をゲノムデータと連動させながら系統的にサーベイし、ユビキチン経路を全体的に検証し、細胞機能を制御するユビキチン経路の把握を拡大、再構築することを目的とした。・UbcP3ユビキチン経路の欠損により遺伝的組換えの頻度が極端に高くなっていることが判明した。さらにヘテロクロマチン相当領域でのgene silencingがUbcP3の欠損で解除されることがわかった。クロマチン構造とその機能の制御にユビキチンも深く関与し、それを通じて遺伝的組換えを抑制する機構があることを示唆している。・UbcP7の欠損は、UbcP2(Rad6ホモログ)のepistasisに属する紫外線感受性を示すことが判明した。このユビキチン経路はnon-canonical E2であるMms2と共役している。Mms2と相互作用する蛋白質としてCpc2を同定した。Cpc2はmeiosisの開始因子Ran1、Cキナーゼ、転写因子GCN4などの負の調節因子として作用していると考えられ、UbcP7/Mms2経路に対しても同様の作用が期待される。Cpc2の欠損はG2遅延を起こすのでチェックポイントに関係していると思われ、UbcP2/UbcP7の複製修復系と周期チェックポイントとのクロストーカーであるとのモデルを検証している。・UbcP1とUbcP4の二つのユビキチン経路によるM期制御:UbcP4は分裂後期促進因子と共役的に働く蛋白質分解経路であることを証明している。UbcP1の変異は分裂期の異常を呈し、UbcP4と全く同じ表現型を示すことが判明した。SecurinとM期サイクリンの分解には2種のE2経路が関与することを示唆している。UbcP4が最初のモノユビキチン化に、UbcP1がその後のポリユビキチン化に働くとの作業仮説を検証している。

目的是扩大和重建泛素途径，从系统上讲，福利酵母中的E2和E3分子物种与基因组数据相关，验证了整个泛素途径，以及控制细胞功能的泛素途径的掌握。・发现，由于Ubcp3 Ubikitin途径的损失，遗传重组的频率非常高。此外，发现由于UBCP3的缺陷，取消了异闭蛋素等效区域中的基因沉默。泛素与染色质结构及其功能的控制深度参与，这表明有一种机制抑制了通过它的遗传重组。 - UBCP7的缺陷显示属于UBCP2上学（RAD6同源物）的紫外线灵敏度。这种无处不在的途径与MMS2（非典型的E2）共同介绍。 CPC2被鉴定为与MMS2相互作用的蛋白质。 CPC2被认为是负调节因子，例如减数分裂起始因子RAN1，C激酶和转录因子GCN4，并且对UBCP7/MMS2途径有相同的影响。 CPC2的不足似乎与检查点有关，因为它会导致G2延迟，并验证了该模型是在UBCP2/UBCP7重复修复系统和周期检查点之间的跨标记。 -M-通过两种泛素路径UBCP1和UBCP4进行的M -Term Control证明UBCP4是一种蛋白质拆卸途径，与第二阶段促进因子起作用。 UBCP1突变在分裂期间显示出异常，表明它显示出与UBCP4完全相同的表达类型。这表明SECERIN和M Cyclin的分解涉及两种类型的E2途径。 UBCP4已验证了UBCP4将用于第一个单胎的工作假设，并且UBCP1将用于多氨基基蛋白。