性ステロイドホルモンによる脳の性分化の分子メカニズム

性类固醇激素诱导脑性别分化的分子机制

• 批准号: 09259211
• 负责人: 加藤 茂明
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09259211/
• 关键词: 神経可塑性; 性ステロイドホルモン; 1次標的遺伝子群; Differential Display法; エストロゲンレセプター; 核内レセプター共役因子; アンドロゲンレセプター

本研究では神経可塑性を性ステロイドホルモンによる脳の性分化という側面から捉え、以下の3点に焦点を当て、特に脳で特異的に発現する性ステロイドホルモンの1次標的遺伝子群の検索を試みた。1)脳内で特異的に発現する性ステロイドホルモン標的遺伝子群の検索:出生直後の実験動物に大量の性ステロイドホルモンを投与すると、その後の性行動に性転換が見られる。そこでこのような性ステロイドホルモンの効果が見られる胎児あるいは出生直後のラットを用い、大量の性ステロイドホルモン投与直後の脳より、急速に誘導される標的遺伝子群をDifferential Display法(D.D.法)にて検索した。同時にこの時期での野生型ラットを用い、雌雄いずれか特異的に発現する遺伝子を同様の手法で検索した。得られたcDNAクローンは定法に従い、コードするタンパクの機能や脳内での局在をin situ法などにより調べた。2)新たなエストロゲンレセプター(ERβ)の脳での発現部位の同定:既知のエストロゲンレセプター(ERα)の発現部位は、視床下部、下垂体等に限定されており、内分泌系でのエストロゲン作用を裏付けるものであった。そこで既にPCR法によって取得したラットERβcDNAを用い、脳の各部位での発現を検討した。3)脳特異的な核内レセプター共役転写因子の検索:核内レセプターは転写制御因子として作用する時には、いわゆる共役転写因子とともに転写制御を行うと考えられる様になってきている。そこで脳特異的な核内レセプター共役因子を、ER及びアンドロゲンレセプター(AR)をプローブに酵母two-hybridシステムにより脳由来cDNAライブラリーより検索した。

在这项研究中，我们研究了性类固醇激素引起的脑性别分化方面的神经可塑性，并专注于以下三个点，并试图寻找在大脑中专门表达的性类固醇激素的主要靶基因。 1）搜索针对大脑中特异性类固醇激素的靶基因：当出生后立即对实验动物进行大量性类固醇激素时，在随后的性行为中观察到性别变化。因此，使用具有这种性类固醇激素作用的胎儿和大鼠，我们使用差异显示方法（D.D.方法）搜索了大量性类固醇激素后立即搜索大脑中迅速诱导的靶基因组。同时，此时使用野生型大鼠搜索使用相同方法在雄性或雌性中特别表达的基因。根据标准方法检查获得的cDNA克隆，并使用原位方法检查了编码蛋白质和在大脑中定位的功能。 2）鉴定新的雌激素受体（ERβ）的脑表达位点：已知的雌激素受体（ERα）表达位点仅限于下丘脑，垂体腺体等，并支持内分泌系统中的雌激素作用。因此，我们使用大脑ERβcDNA在各种大脑部位进行了表达，这已经通过PCR获得。 3）搜索脑特异性核受体偶联转录因子：当核受体充当转录调节剂时，它们被认为是转录调控，以及所谓的共轭转录因子。因此，使用ER和雄激素受体（AR）作为探针，使用酵母双杂交系统从脑衍生的cDNA文库中搜索大脑特异性核受体共价因子。

项目成果

Yoshizawa,T., Kato,S., et al.: "Impaired bone formation and uterine hypoplasia with growth retardation after weaning in mice lacking the vitamin D receptor." Nature Genetics. 16. 391-396 (1997)

Yoshizawa,T.、Kato,S. 等人：“缺乏维生素 D 受体的小鼠断奶后骨形成受损、子宫发育不全并伴有生长迟缓。”

Takeyama,K., Kato,S., et al.: "25-Hydroxyvitamin D_3 1α-hydroxylase and vitamin D synthesis." Science. 277. 1827-1830 (1997)

Takeyama, K.、Kato, S. 等人：“25-羟基维生素 D_3 1α-羟化酶和维生素 D 合成。科学”277。1827-1830 (1997)

Kitanaka,S., Kato,S., et al.: "A new compound heterozygous mutation in the 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 2 gene in a case of apparent mineralocorticoid excess." J.Clin.Endocrinol.Metab.82. 4054-4058 (1997)

Kitanaka,S.、Kato,S. 等人：“在盐皮质激素明显过量的情况下，11β-羟基类固醇脱氢酶 2 型基因出现新的复合杂合突变。”J.Clin.Endocrinol.Metab.82-。 4058 (1997)

Endoh,H., Kato,S., et al.: "Rapid activation of MAP Kinase by estrogen in the bone cell line." Biochem.Biophys.Res.Commun.235. 99-102 (1997)

Endoh,H.、Kato,S. 等人：“骨细胞系中雌激素快速激活 MAP 激酶。”