mafおよびfos jun遺伝子群の細胞分化への役割

maf和fos jun基因在细胞分化中的作用

基本信息

批准号：
07258210
负责人：
西澤誠
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07258210/
关键词：
Mafがん遺伝子転写制御因子 bZip構造

项目摘要

昨年度までにsmall Maf蛋白がCNC familyのbZip蛋白とヘテロ2量体を形成して血球細胞特異的な転写因子NF-E2として機能することなどが明らかになっていた。このNF-E2やv-Mafの転写活性化能を解析する過程で様々な細胞にMafあるいはNF-E2ヘテロ2量体とDNA認識特異性で類似する内在性の極めて強い転写促進活性の存在が観察された。この転写活性化因子は特にNF-E2と類似した認識配列特異性を有するが、gel shift法による解析ではNF-E2やMafのホモ2量体などよりかなり大きな移動度を示した。またMaf family蛋白のdominant negative mutantを細胞に発現する実験などからも、この内在性の強い転写促進活性の本体はおそらく未知のbZip蛋白のヘテロ2量体であり、しかもそのcomponentのいずれかはMaf family蛋白と2量体を形成しうる可能性が強く示唆された。そこでこの因子のcloningを試みている。現在までにWest-western法で未知の遺伝子がいくつか得られ、Two-hybrid法によるcloneも解析中である。既に明らかになっているFos, Junなどとのヘテロ2量体形成に加え、さらに多くのbZip蛋白との2量体形成を明らかにし、その多様な2量体のDNA認識特異性、発現などを明らかにすることによって、Mafファミリー蛋白の正常機能、過剰発現による細胞がん化の機構なども明らかにしていくことが出来るものと期待される。

直到去年，人们才发现小Maf蛋白与CNC家族的bZip蛋白形成异二聚体，并作为血细胞特异性转录因子NF-E2发挥作用。在分析NF-E2和v-Maf的转录激活能力的过程中，我们发现在各种细胞中都存在极强的内源性转录促进活性，其DNA识别特异性与观察到的Maf或NF-E2异二聚体相似。该转录激活因子具有与NF-E2相似的识别序列特异性，但凝胶位移分析表明其比NF-E2和Maf的同源二聚体具有显着更高的迁移率。此外，细胞中表达Maf家族蛋白显性失活突变体的实验表明，这种强内源性转录促进活性的主体很可能是未知bZip蛋白的异二聚体，而且其成分之一就是Maf家族蛋白。强烈暗示它可以与家族蛋白形成二聚体的可能性。因此，我们正在尝试克隆这个因子。迄今为止，已经使用West-western方法获得了几个未知基因，并且目前正在分析使用二杂交方法的克隆。除了已知的与Fos、Jun等形成异二聚体之外，我们还将阐明与许多其他bZip蛋白的二聚体的形成，并研究各种二聚体的DNA识别特异性、表达等。预计我们将能够阐明Maf家族蛋白的正常功能以及因过度表达而导致细胞癌变的机制。